異なる経路での腸腫瘍発生におけるクロマチンリモデリング因子の機能的役割の解明

点击翻译按钮获取中文摘要

①　Conventional & Alternative 経路のマウス腸腫瘍におけるArid1aの機能解析・ マウス腸腫瘍発生におけるArid1aの分子制御機構の解明：それぞれの経路での腸腫瘍におけるArid1aの機能解析を行うために、Arid1aを腸特異的、または腫瘍幹細胞特異的にノックアウトした腫瘍モデルマウスを作成し、腸腫瘍形成・維持におけるArid1aの機能解析を行った結果、それぞれの経路においてArid1aが異なる役割を果たしていることを示唆する実験結果を得た。これをもとに、マウス腫瘍細胞を用いて腫瘍オルガノイドを樹立し、網羅的遺伝子発現比較解析を行った結果、それぞれの経路におけるArid1aの分子制御機構の中心的な役割を果たす下流候補因子を同定した。この候補因子をターゲットとし、in vitroにおいて過剰発現、または抑制実験において、発現系のレスキュー実験を行なっている。② Dysplasia-carcinoma sequenceにおけるArid1aの機能解析：①で作成したノックアウトマウスにDSS（デキストラン硫酸ナトリウム）を投与し、炎症性発癌モデルマウスでのArid1aの役割を検討した結果をもとに、抗生剤投与による炎症抑制実験を行い、腸炎症がArid1a変異下でどのような役割を果たしているかについて解析を行なっている。③ マウス腸腫瘍オルガノイドを用いた薬剤感受性試験：①で得られたマウス腸腫瘍オルガノイドを用いて、卵巣がんなどでArid1aとの合成致死性が報告されているEZH1/2阻害剤、ATR阻害剤、PI3K/AKT阻害剤を候補とした薬剤感受性試験を評価中である。④ ヒト腸腫瘍におけるARID1Aの発現解析：ヒト大腸腫瘍におけるARID1Aの発現解析中である。さらに、ヒト大腸腫瘍細胞からオルガノイドを現在３０例以上樹立し、それぞれのオルガイノイドにおけるARID1A発現有無を評価した。加えて、①で得られた機能解析結果をもとに、候補分子の発現解析を行なっている。