肺腺癌における予後予測バイオマーカーの探索

寻找肺腺癌的预后生物标志物

• 批准号: 21K16135
• 负责人: 安藤 孝浩
• 金额: $ 3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16135/
• 关键词: 肺腺癌; NECTIN 2; ノックアウト; 細胞増殖能; 切除検体; 膜タンパク; Recurrence－free survival; 肺癌; バイオマーカー

2022年度には、CRISPR-Cas 9 を使用して NECTIN 2 ノックアウト肺癌細胞株（H522, H1650）を作成し、細胞増殖能アッセイでWTに比べてKO株で有意に細胞増殖能が低下することを確認した。またアポトーシスアッセイではKO株でアポトーシスが増加することを確認した。細胞遊走能についても同様に確認し、WTに比べてKO株で有意に遊走能が低下することを確認した。CRISPR-Cas 9 によるオフターゲット効果の可能性が否定できないため、KO株の機能を Rescue できるか検討する予定である。また、 NECTIN 2 強制発現ベクターを作成し、NECTIN 2 低発現細胞株に導入して機能解析を開始した。細胞増殖能および細胞遊走能では、WT株とNECTIN 2　強制発現株で有意差は認めなかった。今後臨床検体について免疫染色を行うことを検討している。

2022 に は CRISPR - Cas. 9 を use し て NECTIN 2 ノ ッ ク ア ウ ト lung cancer cell line (H522 H1650) を make し, cells raised colonization ア ッ セ イ で WT に than べ て KO で intentionally に cell rights can yield low が す る こ と を confirm し た. Youdaoplaceholder0 またアポト シスアッセ で で で シスアッセ KO strain でアポト またアポト シスが シスが シスが increase する する とを とを confirm た. Cells can wander に つ い て も with others に confirm し, WT に than べ て KO strains で intentionally に can wander が low す る こ と を confirm し た. CRISPR - Cas 9 に よ る オ フ タ ー ゲ ッ ト unseen fruit の possibility が negative で き な い た め, KO strains の functional を Rescue で き る か beg す 検 る designated で あ る. Youdaoplaceholder0, NECTIN 2 forced emergence ベ ベ タ タ を を to form <s:1>, NECTIN 2 low emergence cell line に introduction <s:1> て function analysis を start た. Cell proliferation ability および cell migration ability で で, WT strain とNECTIN 2 forced emergence strain で intentional difference <e:1> recognition めな った った. In the future, clinical 検 body に に て て て immunostaining を will be carried out う とを検 とを検 とを検 to explore て て る る.