COVID-19におけるサイトカイン放出症候群発症機序の解明とリスク因子の同定

阐明细胞因子释放综合征的发病机制并识别 COVID-19 的危险因素

• 批准号: 21K16287
• 负责人: 森田 貴義
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16287/
• 关键词: COVID-19重症化リスク; サイトカイン放出症候群; S1サブユニット; CyTOF; マスサイトメーター; COVID-19; マスサイトメトリー; Immunophenotyping; コロナウイルスS蛋白

COVID-19重症化リスクを反映する臨床的指標として、94論文、2549名の患者データを用いて、重症化患者の中で死亡患者では発症から入院・気管挿管までの日数が生存患者より長い傾向を発見した(Front Med.2021.)。さらに100論文、13431名の患者データを用いて、上気道からのウイルス排出期間は18.29日でその排出日数は、高齢、合併症の存在、重症、ステロイド使用で延長することを発見した(Inflamm Regenen. in press)。SARS-CoV-2蛋白のS１サブユニットが重症化に関与していると考え、COVID-19患者血清中のS１サブユニットを測定した結果、重症患者でS１サブユニットが検出された。そこで、健常者PBMCにS１サブユニットを投与しその免疫応答をCyTOF にて評価した。その結果、classical monocytes (cMos)よりIL-1β, IL-6, IL-8, TNF-α, IP-10産生が認められた。COVID-19の第一波と第二波における重症患者と健常者のPBMCをCyTOFにて解析した結果、cMosにおいてCD86やHLA-DRの低下、TLR4, Ki-67, Mx-1, CD147の上昇が確認された。同様に患者PBMCのRNAseqでもCD147やそれに関連する遺伝子発現の上昇が示唆された。そこでSARS-CoV-2の共受容体の一つとして考慮されておりその阻害抗体投与でCOVID-19重症化を改善する可能性が指摘されているCD 147に注目した。CD147をノックアウト(KO)したTHP1細胞を樹立し、S１サブユニットをふりかけた結果、炎症性サイトカイン産生が低下することを発見した。現在引き続きS1サブユニットとCD147のCOVI D-19重症化におけるインパクトや治療標的としての可能性について評価している。

使用94篇论文和2,549个患者数据作为临床指标，反映了COVID-19变得严重的风险，我们发现，在严重患者中，从起床到住院和内托管插管的天数往往比幸存的患者更长（前Med。2021）。使用来自13,431名患者的100篇论文和数据，我们发现上呼吸道的病毒排泄持续时间为18.29天，而排泄日期则延长了年龄，并发症，并发症，严重疾病和类固醇的使用（Press。炎症）。人们认为SARS-COV-2蛋白的S1亚基参与了严重疾病的发展，并且由于测量了COVID-19患者血清中S1亚基的结果，在严重患者中检测到S1亚基。因此，将S1亚基用于健康的PBMC，并使用Cytof评估免疫反应。结果，经典的单核细胞（CMOS）产生IL-1β，IL-6，IL-8，TNF-α和IP-10。在COVID-19的第一和第二波中，对严重患者和健康个体的PBMC的细胞分析显示，CD86和HLA-DR的降低，TLR4，KI-67，MX-1和CD147在CMOS中的降低。同样，PBMC患者的RNASEQ表明CD147和相关基因表达增加。因此，我们专注于CD 147，后者被认为是SARS-COV-2的共受体，并指出，当它被施用以抑制抗体时，它可能会改善严重的Covid-19症状。我们发现，建立了击倒CD147（KO）的THP1细胞，并撒上S1亚基，从而减少炎症细胞因子的产生。目前，我们正在继续评估S1亚基和CD147对Covid-19的发展及其作为治疗靶点的潜力的影响。

项目成果

SARS-CoV-2スパイク蛋白のCOVID-19炎症病態における病態意義の検討

检查 SARS-CoV-2 刺突蛋白在 COVID-19 炎症病理学中的病理学意义

• 发表时间: 2022
• 作者: 村上輝明;山口勇太;森田貴義;加藤保宏;平田春彦;武田吉人;熊ノ郷淳
• 通讯作者: 熊ノ郷淳