EGFR遺伝子変異陽性pN1-2肺癌術後の予後に関するシグナル経路・分子の解明

EGFR基因突变阳性pN1-2肺癌术后预后相关信号通路和分子的阐明

• 批准号: 21K16519
• 负责人: 伊坂 哲哉
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kanagawa Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16519/
• 关键词: 逆相蛋白質アレイ解析; EGFR遺伝子変異陽性肺癌; tissue microarray; EGFR; TKI

逆相蛋白質アレイ解析(RPPA)による病理学的にリンパ節転移を有する(pN(+)) EGFR L858R点突然変異陽性肺癌 (Ex21)で特異的に活性化するシグナル因子を同定すべく, EGFR exon19 deletion変異陽性肺癌(Ex19)を含めた症例の選抜, 新規の抗体選定, 少数例でのRPPA解析を行ってきた。今まで少数例 (Ex21 10例, Ex19 7例)を用いてRPPA解析を行い, 解析条件の検討を行った.昨年は対象とするEGFR遺伝子変異肺癌症例選定を増やし, Ex21 66例, Ex19 63例, 合計129例を再選抜した. これまでEGFR/MAPK経路, PI3K-AKT経路に関連した16種の抗体を選定したが, 今年度は新たにRBM10抗体, PD-L1抗体, p53抗体を追加選抜した. この3つ抗体の臨床的な意義を確認すべく, pN(+) Ex21およびpN(+)Ex19のEGFR遺伝子変異陽性肺癌129例のtissue microarrayを作成した. RBM10の役割の解明目的に,作成したtissue microarrayを用いてRNAscopeによるRNA in situ hybridizationにてRBM10の局在を確認した.今年度3つの抗体とpN(+)EGFR遺伝子変異陽性肺癌の予後との関連性およびEGFR-TKIへの奏効性との関連性の解析結果が得られたので, 本結果については論文作成中である. 今後は追加したこれら新規抗体を用いてpN(+)Ex21で活性化している蛋白を網羅的に解析し, 予測した悪性化進展シグナル経路の妥当性を多症例で検証していく予定である. そして引き続きpN(+)Ex21変異肺癌に特異的に発現する蛋白質をターゲットとした治療薬の開発を目指していく予定である.

Reverse phase protein analysis (RPPA) is used to analyze pathological changes (pN(+)) EGFR L858 R-point mutation in lung cancer (Ex21), specific activation of EGFR exon19 deletion in lung cancer (Ex19), selection of new antibodies, and analysis of RPPA in a few cases. A few cases (Ex21 10 cases, Ex19 7 cases) were analyzed using RPPA, and the analysis conditions were discussed. Last year, EGFR gene expression increased by 21 66 cases and 19 63 cases, totaling 129 cases. 16 antibodies were selected for EGFR/MAPK pathway, PI3K-AKT pathway, RBM10 antibody, PD-L1 antibody, p53 antibody were added for this year. pN(+) Ex21 and pN (+)Ex19 were used to construct a tissue microarray of 129 lung cancer patients with EGFR gene heteropositive. RBM 10 was isolated and purified by RNA hybridization in RNAscope. The relationship between pN(+)EGFR gene expression and EGFR-TKI gene expression in lung cancer was analyzed. In the future, we will add a new antibody to the pN(+)Ex21 protein network to analyze, predict and evaluate the progress of the protein network. The expression of pN(+)Ex21 is specific to lung cancer.