The significance of interleukin-22 related proteins on disruption of intestinal homeostasis in sepsis

白细胞介素22相关蛋白对脓毒症肠道稳态破坏的意义

• 批准号: 21K16569
• 负责人: 大網 毅彦
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16569/
• 关键词: 腸管透過性; IL-22; 腸内細菌叢; 盲腸結紮穿孔モデル; 集中治療; 敗血症; Interleukin-22

敗血症において，腸管は炎症を惹起して病態を増悪させうる”モーター”として注目されている。バリア機能の低下した腸管上皮細胞や活性化した腸管の免疫担当細胞，バランスの乱れた腸内細菌叢が臓器不全の進行を促進しうる。腸管免疫担当細胞から分泌されるinterleukin (IL)-22は腸管上皮の再生を促進し，抗菌ペプチドの産生誘導により腸内細菌叢に好影響を与える。炎症性腸疾患の分野ではIL-22の生体保護的な役割が明らかにされている一方で，敗血症病態でIL-22に注目して腸管恒常性の破綻を検討した研究はない。今回，敗血症モデルである盲腸結紮穿孔（CLP）手術を施行したマウスから小腸を採取し，パイエル板や腸管上皮細胞間T細胞，粘膜固有層に存在する免疫担当細胞を分離した上でIL-22，IL-22 binding protein（BP）抗体で染色して白血球の分画ごとにIL-22関連蛋白の陽性細胞数を解析する。そして，IL-22の制御を企図した遺伝子欠損マウスを用いて敗血症モデルを作成し，IL-22関連蛋白の機能解析を行う。現在CLPモデルマウスの小腸を採取してCD4T細胞と自然リンパ球（ILC）をIL-22抗体で染色してフローサイトメトリーで解析する実験に取り組んでいる。また，IL-22の制御を企図した遺伝子欠損マウスとしてIL-22欠損マウスの繁殖を進め，現在生存率解析を行なっている。今後，CLP手術を行ったコントロールマウスとIL-22欠損マウスを用いて生存率解析や腸管透過性測定，血中サイトカイン測定，腸内細菌叢解析を行う。一方で，IL-22の抑制系蛋白であるIL-22BPを欠損させたIL-22BPマウスに関しても繁殖を行っており，十分な数のマウスが確保できしだい実験を進める予定である。これらの実験結果をもとに，敗血症病態におけるIL-22の腸管恒常性への関与を解明し，IL-22の制御による敗血症の治療につなげることを目的とする。

Sepsis is caused by inflammation of the intestinal tract, which causes morbidity and morbidity. The activation of intestinal epithelial cells and immune-responsive cells in the intestinal tract are caused by the low function of the intestinal tract, and the promotion of the intestinal bacterial plexus and the incomplete progress of the organ are promoted. Intestinal immune response cells secrete interleukin (IL)-22, which promotes the regeneration of intestinal epithelium, and induces the production of antibacterial IL-22, which has a good influence on intestinal bacterial flora. Inflammatory bowel disease's division of IL-22's biological protectionで, IL-22 has attracted much attention in the pathogenesis of septicemia, and the flaw in intestinal constancy has been investigated and studied. This time, Cecal Ligation and Puncture (CLP) surgery for septicemia was performed, and the small intestine was taken out. IL-22 is present in the intestinal epithelial cells of the intestinal tract and is present in the lamina propria of the mucosa. Immune responsible cells are isolated and produced. IL-22 Binding protein (BP) antibody staining, white blood cell classification, and IL-22-related protein-positive cell number analysis.そして, IL-22's control system is made of いて septicemia system, and the functional analysis of IL-22 related protein is done. Currently, CLP is using natural small intestine CD4 T cells (ILC). IL-22 antibody staining method is used to analyze the staining method and the group is analyzed.また, IL-22's control of the disease, the survival rate analysis of the current survival rate of the disease. From now on, CLP surgery will be carried out with the help of IL-22-deficient IL-22 based on the survival rate analysis, intestinal permeability measurement, blood gut permeability measurement, and intestinal bacterial flora analysis. On the one hand, the inhibitory protein of IL-22 is the same as IL-22BP.に关しても breeding を行っており, 10な号のマウスがsure is できしだい実験を入める为定である.これらの実験 Results をもとに, septicemia morbidity におけるIL-22のintestinal homeostasis への switch It is related to the purpose of IL-22 control and treatment of septicemia.