Development of an early diagnosis method for treatment-resistant sarcoma by applying glucose metabolism imaging.

应用葡萄糖代谢成像开发难治性肉瘤的早期诊断方法。

• 批准号: 21K16700
• 负责人: 小川 哲也
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16700/
• 关键词: 糖代謝イメージング; 蛍光L-グルコース; 2-NBDLG; ヒト骨肉腫; SP分析; SP細胞; 抗癌剤耐性; ABCトランスポーター; 肉腫; 蛍光グルコース; がん幹細胞

近年、D-グルコースの鏡像異性体L-グルコースに蛍光基を結合した蛍光L-グルコースが、悪性細胞に特異的に取り込まれる可能性が示され注目されている。我々はヒト骨肉腫U2OS細胞が、正常細胞が取り込まない2-NBDLGを取り込むことを確認した。また2-NBDLG投与後の蛍光強度が個々の細胞によって異なることから、U2OS細胞には糖代謝が異なる細胞、すなわち蛍光L-グルコースを豊富に取り込む細胞とほとんど取り込まない細胞が混在すると考えた。本研究は2-NBDLGの取り込みと腫瘍細胞の抗癌剤耐性の関係を検討する。抗癌剤ドキソルビシン（DOX）添加培地で増殖する抗癌剤耐性U2OS細胞を作成した。作成したDOX耐性U2OS細胞がSP分析可能か検討した。SP分析の結果は通常培養U2OS細胞と比較してSP細胞の割合が有意に増加した。そこでU2OS細胞を通常培地で培養した通常群、培地にDOXを加えて培養したDOX群、DOX群をHoechst33342で染色したのちにFACSを用いてSP細胞を分取したSP群を準備しFACSで蛍光グルコースの取り込みを評価した。DOX群はHoechst33342を排出する細胞群が有意に増加した。その薬剤排出能はverapamil（ABCB1阻害剤）によって阻害され、排出の主体はABCB1によるものであることが明らかとなった。またDOX群は通常群に比較して2-NBDLGが2-NBDGとほぼ同量に取り込まれ、DOX耐性細胞で蛍光グルコースの代謝変化が示唆された。通常群と比較してSP群もDOX群と同様に2-NBDGに対する2-NBDLG取り込みの割合が増加した。この取り込みはPhloretin投与で減少したことから、2-NBDLGは細胞の幅広い輸送機構を利用して選択的に取り込まれている可能性が示された。

In recent years, D - グ ル コ ー ス の mirror straight body L - グ ル コ ー ス に 蛍 light base を combination し た 蛍 light L - グ ル コ ー ス が, 悪 cells take り に specific に 込 ま れ が る possibility in さ れ attention さ れ て い る. I 々 は ヒ ト flesh swelling が U2OS cells and normal cells take り が 込 ま な い 2 - NBDLG を take り 込 む こ と を confirm し た. ま た after 2 - NBDLG cast and の 蛍 light intensity が a 々 の cells に よ っ て different な る こ と か ら, U2OS cell に は sugar metabolism が different な る cells, す な わ ち 蛍 light L - グ ル コ ー ス を aboundant に take り 込 む cells と ほ と ん ど take り 込 ま な が い cells in す る と exam え た. In this study, <s:1> 2-NBDLG <s:1> investigated the association of <s:1> anti-cancer tolerance <e:1> of <s:1> 込みと abscess cells を検 to explore する. Anti-cancer agent ドキソ ビシ ビシ <e:1> (DOX) is added to pedide で to proliferate する anti-cancer drug-resistant U2OS cells を to prepare <s:1> た. The がSP analysis of <s:1> た dox-resistant U2OS cells may be 検 検 to obtain <s:1> た. The <s:1> results of SP analysis usually show that when culturing U2OS cells と, the comparison of <s:1> てSP cells is made, and the <s:1> cleavage of が intentionally increases に た. を そ こ で U2OS cells usually petty で cultivate し た usually group, the petty に DOX を plus え て cultivate し た DOX group, DOX group を Hoechst33342 で dyeing し た の ち に both FACS を with い て を SP cells divide し た SP of を prepared し both FACS で 蛍 light グ ル コ ー ス の take り 込 み を review 価 し た. DOX population を Hoechst33342を excretion する cell population が intentional に increase of た. そ の 薬 tonic discharge can は verapamil (ABCB1 resistance against tonic) に よ っ て resistance against さ れ, eduction の subject は ABCB1 に よ る も の で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. ま た DOX group は usually group に compare し て 2 - NBDLG が 2 - NBDG と ほ ぼ commensuration に take り 込 ま れ, DOX patience cell で 蛍 light グ ル コ ー ス の metabolic variations change が in stopping さ れ た. Group of と generally し て SP group も と DOX group with others in に 2 - NBDG に す seaborne る 2 - take り NBDLG 込 み の cut close が raised し requirement by た. こ の take り 込 み は Phloretin cast with で reduce し た こ と か ら, 2 - NBDLG は cells の picture hiroo い transportation agencies を using し て sentaku に take り 込 ま れ て い が る possibility in さ れ た.