歯根膜培養上清とエピゲノム修飾技術を応用した歯髄誘導型人工的歯根膜の作製

利用牙周膜培养上清液和表观基因组修饰技术创建牙髓诱导的人工牙周膜

• 批准号: 21K17025
• 负责人: 原田 文也
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Health Sciences University of Hokkaido
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K17025/
• 关键词: 歯周組織再生; エピジェネティクス修飾; 歯根膜線維芽細胞; 歯髄－歯根膜線維芽細胞相違遺伝子; 歯髄誘導型人工歯根膜

歯牙への栄養供給を行う歯髄組織に存在する歯髄幹細胞は、再生医療への応用可能性が示唆されているが、臨床応用へは未だ進んでいない。一方、歯根膜の喪失を主体とした歯周炎では、エムドゲインなどの歯周組織再生療法が臨床応用されているが、その適応症は中等度歯周炎までに限定されており、抜歯適応となる重度歯周炎に対しての有効な治療法は未だ無い。歯髄と歯根膜は線維芽細胞を主体とした複数の細胞集合体であり、それぞれ幹細胞も存在するなど共通点もあるが、マラッセ上皮細胞の有無などによる機能遺伝子の違いもある。その違いを改良し、歯髄を歯根膜様組織へ誘導できれば新たな歯周組織再生療法として応用可能になると考える。本研究では、歯髄でOFFになっている歯根膜機能遺伝子の発現誘導を行い、歯髄誘導型人工的歯根膜を作製することを目的とする。今年度は、歯髄と歯根膜の機能遺伝子の違いを解析するために、歯髄培養細胞と歯根膜培養細胞からtotal RNAを抽出後、次世代シーケンサーによるRNA発現網羅的解析を行った。その結果、昨年度の定量的RT-PCR法で確認した、歯髄―歯根膜誘導群で発現上昇した歯根膜機能遺伝子PERIOSTINおよびS100 calcium-binding protein A4 (S100A4)、neural cell adhesion molecule 1 (NCAM1)について、歯髄サンプルに比べ歯根膜サンプルでの発現上昇傾向を認めた。さらに、歯根膜サンプルでは歯髄サンプルに比べ発現の上昇した上位20位遺伝子にKERATIN14, 16が該当した。KERATIN 14, 16は歯髄には存在しないが歯根膜に存在するマラッセ上皮遺残の発現遺伝子であることから、Keratin 14, 16は歯髄を歯根膜に誘導するための重要な遺伝子である可能性が示唆された。

歯 tooth へ の tech students.their ownship raise supply line を う 歯 marrow tissue に exist す る 歯 は marrow stem cells, regeneration medical へ の 応 が with possibility in stopping さ れ て い る が, clinical 応 へ は not だ into ん で い な い. One loss, 歯 root membrane の を subject と し た 歯 periarthritis で は, エ ム ド ゲ イ ン な ど の 歯 weeks tissue regeneration therapy clinical 応 が with さ れ て い る が, そ franch の 応 disease は medium 歯 periarthritis ま で に qualified さ れ て お り, sorting 歯 optimum 応 と な る severe 歯 periarthritis に し seaborne て の have sharper な therapy は not だ い. 歯 marrow と 歯 root membrane は を subject line d bud cells と し た plural の cells aggregate で あ り, そ れ ぞ れ stem cells have す も る な ど in common も あ る が, マ ラ ッ セ epithelial cells の presence of な ど に よ る function heritage 伝 son の violations い も あ る. そ の violations い を improved し, 歯 marrow を 歯 root membrane others organization へ induced で き れ ば new た な 歯 weeks tissue regeneration therapy と し て 応 may use に な る と exam え る. This study で は, 歯 marrow で OFF に な っ て い る 歯 root membrane function heritage 伝 son の 発 now induced を い, 歯 marrow induced type artificial 歯 root membrane を cropping す る こ と を purpose と す る. Our は, 歯 marrow と 歯 root membrane function of の heritage 伝 son の violations い を parsing す る た め に, 歯 marrow culture cell と 歯 root culture cell membrane か ら を total RNA extraction, next generation after シ ー ケ ン サ ー に よ 発 る RNA is now a net line analytical を っ た. そ の results, annual の quantitative rt-pcr method で yesterday confirmed し た, 歯 marrow - 歯 induced root membrane group で 発 now rising し た 歯 root membrane function heritage 伝 son PERIOSTIN お よ び according to calcium - binding protein A4 (S100A4) and neural cell Adhesion molecule 1 (NCAM1) に つ い て, 歯 marrow サ ン プ ル に than べ 歯 root membrane サ ン プ ル で の 発 now rising tendency を recognize め た. さ ら に, 歯 root membrane サ ン プ ル で は 歯 marrow サ ン プ ル に than べ 発 now rising の し た upper 20 heritage 伝 son に KERATIN14, 16 が should し た. KERATIN 14, 16 は 歯 marrow に は exist し な い が 歯 root membrane に exist す る マ ラ ッ セ traces of epithelial remnants の 発 now heritage 伝 son で あ る こ と か ら, KERATIN, 14, 16 は 歯 marrow を 歯 induced root membrane に す る た め の important な heritage 伝 son で あ が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

thylation analysis of epithelial-mesenchymal cell populations induced into periodontal ligament-like cells

诱导成牙周膜样细胞的上皮间充质细胞群的甲基化分析

• 发表时间: 2021
• 作者: Fumiya Harada;Koki Yoshida;Shuhei Takahashi;Aya Onishi;Dedy Ariwansa;Ariuntsetseg Khurelchuluun;Durga Paudel;Daichi Hiraki;Tetsuro Morikawa;Osamu Uehara;Jun Sato;Yoshihiro Abiko;Hiroki Nagayasu
• 通讯作者: Hiroki Nagayasu

Phenotypic transformation of dental pulp cells into periodontal ligament-like cells.

牙髓细胞向牙周膜样细胞的表型转化。

• 发表时间: 2022
• 作者: Onishi Aya;Yoshida Koki;Morikawa Tetsuro;Paudel Durga;Takahashi Shuhei;Khurelchuluun Ariuntsetseg;Ariwansa Dedy;Harada Fumiya;Uehara Osamu;Kurashige Yoshihito;Abiko Yoshihiro;高橋 周平，原田 文也，吉田 光希，Dedy Ariwansa， Ariuntsetseg Khurelchuluun，Durga Paudel，森川 哲郎，植原 治，永易 裕樹，安彦 善裕;Shuhei Takahashi，Koki Yoshida，Durga Paudel，Fumiya Harada，Tetsuro Morikawa，Yoshihiro Abiko
• 通讯作者: Shuhei Takahashi，Koki Yoshida，Durga Paudel，Fumiya Harada，Tetsuro Morikawa，Yoshihiro Abiko

Expression analysis of periodontal ligament-related genes in co-culture of dental pulp cells and ERM applying epigenome modification

表观基因组修饰牙髓细胞与ERM共培养中牙周膜相关基因的表达分析

• 发表时间: 2021
• 作者: Koki Yoshida;Fumiya Harada;Daichi Hiraki;Hiroki Nagayasu;Yoshihiro Abiko
• 通讯作者: Yoshihiro Abiko

歯根膜培養上清を用いた歯髄細胞の歯根膜様細胞への誘導におけるメチル化解析

利用牙周膜培养上清液诱导牙髓细胞分化为牙周膜样细胞的甲基化分析

• 发表时间: 2022
• 作者: Onishi Aya;Yoshida Koki;Morikawa Tetsuro;Paudel Durga;Takahashi Shuhei;Khurelchuluun Ariuntsetseg;Ariwansa Dedy;Harada Fumiya;Uehara Osamu;Kurashige Yoshihito;Abiko Yoshihiro;高橋 周平，原田 文也，吉田 光希，Dedy Ariwansa， Ariuntsetseg Khurelchuluun，Durga Paudel，森川 哲郎，植原 治，永易 裕樹，安彦 善裕
• 通讯作者: 高橋 周平，原田 文也，吉田 光希，Dedy Ariwansa， Ariuntsetseg Khurelchuluun，Durga Paudel，森川 哲郎，植原 治，永易 裕樹，安彦 善裕

Induction of dental pulp cells into periodontal ligament-like cells using epigenetics

利用表观遗传学将牙髓细胞诱导成牙周膜样细胞

• 发表时间: 2021
• 作者: Shuhei Takahashi;Koki Yoshida;Durga Paudel;Dedy Ariwansa;Ariuntsetseg Khurelchuluun;Aya Onishi;Tetsuro Morikawa;Daichi Hiraki;Fumiya Harada;Osamu Uehara;Jun Sato;Hiroki Nagayasu;Yoshihiro Abiko
• 通讯作者: Yoshihiro Abiko