Highly acccurate oral cancer screening system by detection of genome-wide aberrant methylation

通过检测全基因组异常甲基化建立高精度口腔癌筛查系统

基本信息

批准号：
21K17120
负责人：
原口和也
金额：
$ 3万
依托单位：
Kyushu Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K17120/
关键词：
hTERT遺伝子口腔癌口腔粘膜疾患異常メチル化電気化学的ハイブリダイゼーションアッセイテロメラーゼ hTERTタンパク口腔癌のセルフスクリーニング EHA法癌のセルフスクリーニング口腔扁平上皮癌スクリーニングシステム

项目摘要

口腔癌の早期発見、早期治療が重要であることは周知の事実であるが、他の口腔粘膜疾患と類似するものも多く、診断に苦慮することがしばしばある。また、口腔癌に進行する前の前癌病変あるいは前癌状態の段階で早期発見し、早期に治療介入することが重要と考えられる。口腔癌は直視直達が可能な部位に発生するにも関わらず、口腔癌を早期発見するためのスクリーニングシステムは存在しない。ゆえに、口腔癌を含む口腔粘膜疾患の早期診断の一助となるスクリーニングシステムの開発が重要である。本研究ではまず、hTERT遺伝子のプロモーター領域におけるメチル化を、九州工業大学で開発された電気化学的ハイブリダイゼーションアッセイ(EHA)を用いて解析している。検体は、①病変を含む口腔内全体をスポンジブラシで拭って得た剥離細胞、②病変を歯間ブラシで擦過して得た剥離細胞、③病変の小組織片とした。現在までの研究では、臨床検体の採取とともに、EHA法のスクリーニングとしての有用性を検証するため現在広く用いられている口腔癌のスクリーニングである液状化検体細胞診との関係について検証を行った。結果は、口腔癌患者では検体の採取法に依らず白板症患者と比較してhTERT遺伝子プロモーター領域のCpG部位における異常メチル化の割合が有意に高かった。組織および局所剥離細胞におけるEHA結果とLBC判定との間の相関係数はそれぞれ0.513および0.542と相関関係を認めた。また、LBC判定が陰性であった症例に着目すると、陰性であったにも関わらず組織診にてOSCCであった症例は3例であった。それらの症例のEHA結果は陰性であったその他の症例のなかでも比較的大きなEHA結果であった。故にEHA結果は, 以前より行われている口腔癌スクリーニングであるLBC判定との間に相関関係を認め、EHAは口腔癌スクリーニングとして有用である可能性が示唆された。

众所周知，早期发现和治疗口腔癌很重要，但是其中许多与其他口腔粘膜疾病相似，并且诊断通常很困难。人们认为，在癌前病变或癌前阶段的早期发现口腔癌和治疗早期进行干预也很重要。尽管口腔癌发生在可能的直接查看区域，但没有筛查系统以早期发现口腔癌。因此，建立筛查系统很重要，该筛查系统将有助于早期诊断口腔粘膜疾病（包括口腔癌）。在这项研究中，首先使用京胡理工学院开发的电化学杂交测定法（EHA）对HTER基因的启动子区域的甲基化进行了分析。样品是1）通过擦除整个口腔的分离细胞，包括用海绵刷的病变，2）通过用牙间刷擦损伤获得的分离细胞，以及3）病变的小组织块。迄今为止的研究是与临床标本的收集结合进行的，并验证与液化标本细胞学的关系，这是目前广泛使用的口服癌症的筛查，以验证其作为EHA方法筛查的有用性。结果表明，口腔癌患者在HTERT基因启动子区域的CpG部位的异常甲基化率明显高于白血病患者，无论样品采集方法如何。 EHA结果与LBC测定之间的相关系数与局部等分细胞的确定分别与0.513和0.542相关。此外，当查看LBC为阴性的病例时，在三种情况下，尽管阴性为阴性，但在组织学检查中进行了OSCC。在其他情况下，这些情况的EHA结果相对较大。因此，EHA结果显示先前进行的口腔癌筛查LBC之间存在相关性，这表明EHA可能可作为口腔癌筛查。