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カイメンにおけるメンブレンベシクルを介した物質輸送の解明

阐明海绵中通过膜囊泡的物质运输

基本信息

批准号：
22K14811
负责人：
二宮章洋
金额：
$ 1.75万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K14811/
关键词：
カイメンメンブレンベシクル共生微生物

项目摘要

八丈島沖でカイメンTheonella swinhoeiを採取した。当該カイメンには内部が黄色いものと白いものがあり、以下それぞれ「TSY」「TSW」と呼ぶ。カイメンを破砕し、破砕液を濾過した。多段階の遠心分離による分画によって、メンブレンべシクルを含む画分を得た。条件検討の結果、緩衝液として塩化ナトリウムを含むHEPES、密度勾配の媒体としてOptiPrepを用いた密度勾配遠心分離によって、脂質を含む画分がバンドとして得られることがわかった。TSYにおいては、密度勾配遠心分離の結果、3つのバンドが生じた。ネガティブ染色法によってこれらの画分を観察したところ、上2つの画分には約200 um程度の小胞様構造物が見られた。一方、TSWにおいては、密度勾配遠心分離の結果、1つのバンドが生じた。ネガティブ染色法によって観察したところ、TSYで見られたものより小さい、数十um程度の小胞様構造物が見られた。さらに、各画分を有機溶媒で抽出してLCMSによって分析したところ、小胞様構造物を含む画分に、セオネラミド、オンナミド、およびミサキノリドが含まれることが明らかになった。

八份问卷调查了塞奥内拉·斯温霍氏菌。当齐奇奇将自己的内部黄色警戒线白色警戒线调高时，下面的人就会喊“TSY”“TSW”。カイメンを破砕し、破砕液を濾過した。多段階の遠心分離による分画によって、メンブレンべシクルを含む画分を得た。条件软化浸提液HEPES浸提液浸提液OptiPrep浸提液，树脂浸提液浸提液OptiPrep浸提液。TSY类风湿关节炎，密度硬化配型心脏分型，3种风湿性关节炎。荧光染料染色法制备荧光染料分光示波器，上2个荧光染料分光光度计为200 μ m量级的小细胞色素致敏剂。一方，TSW类风湿性关节炎，密度硬化配型心分型风湿性关节炎，1例风湿性关节炎患者。荧光染料染色法检测示波器的灵敏度，TSY荧光染料的检测要求小范围，数量级小细胞染料的制备方法。细胞培养、各绘分溶液有微量提取物的LCMS微量分析仪检测、小细胞肺癌生成物含微量绘分、微量护理试剂盒检测等。