SLCOトランスポーターをコアとするチャネル活性発現機構の解明

阐明以SLCO转运蛋白为中心的通道活性表达机制

基本信息

  • 批准号:
    22K15295
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 财政年份:
    2022
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2022-04-01 至 2025-03-31
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

生体内イオンの細胞膜透過を担うトランスポーターとチャネルは構造、性質的に似て非なる膜タンパク質であるが、中には両方の活性を持つタンパク質がいくつか報告されている。しかし、その活性発現調節機構や二重活性を有する生理学的意義については解明されていない例が多い。本研究では、プロスタグランジン (PG) トランスポーターおよびMaxi-Clチャネルの二重機能を持つことが近年新たに明らかとなったSLCO2A1について、その活性発現機構と生理学的意義の解明、さらにはチャネル活性を有する他SLCO分子の探索を目的に研究を行っている。2022年度は、SLCO2A1のトランスポーター/チャネル活性使い分け機構の解明を目的に検討を行った。これまでに、SLCO2A1のチャネル活性が報告されたマウス乳腺由来C127細胞ではPG輸送とMaxi-Clの両活性が発現すること、また本細胞にMaxi-Clを活性化させる低張刺激を与えてもPG輸送活性がほとんど変化しないことを見出した。さらに、Maxi-Cl活性化に必須なアクセサリータンパク質ANXA2/S100A10を遺伝子欠損させてもPG輸送機能が維持されたことから、これらはPG輸送に必須でないことも明らかになった。したがって、SLCO2A1はPGトランスポーターとして常時機能しながら、特定の刺激に応じてMaxi-Cl活性を発現する膜タンパク質であることが示された。このほか2022年度は、ANXA2/S100A10以外のMaxi-Clアクセサリータンパク質探索のためのFLAGタグ結合SLCO2A1発現細胞を構築した。抗FLAG抗体を用いた免疫沈降法により、少なくともSLCO2A1とANXA2の結合が確認できたため、今後は免疫沈降サンプルについてプロテオミクス解析を実施し、未知のMaxi-Clアクセサリータンパク質探索および相互作用メカニズムの解明に取り組む予定である。
Born in vivo イ オ ン の membrane through を bear う ト ラ ン ス ポ ー タ ー と チ ャ ネ ル は structure and properties of に seems て な る membrane タ ン パ ク qualitative で あ る が, medium に は struck party の active を hold つ タ ン パ ク qualitative が い く つ か report さ れ て い る. し か し, そ の 発 presently active regulating mechanism や double active を have す る physiology significance に つ い て は interpret さ れ て い な が much い い example. This study で で, プロスタグラ プロスタグラ ジ ジ (PG) ト ラ ン ス ポ ー タ ー お よ び Maxi - Cl チ ャ ネ ル の double function を hold つ こ と が in recent years, new た に Ming ら か と な っ た SLCO2A1 に つ い て, そ の active 発 institutions now と physiology の uttered, the significance of さ ら に は チ ャ ネ ル activity を す る he SLCO molecular の explore を purpose に を line っ て い る. 2022 annual は, SLCO2A1 の ト ラ ン ス ポ ー タ ー / チ ャ ネ ル け mechanism with active make い の interpret を purpose に 検 line for を っ た. こ れ ま で に, SLCO2A1 の チ ャ ネ が ル activity report さ れ た マ ウ ス mammary gland origin C127 cells で は PG conveying と Maxi - Cl の struck active が 発 now す る こ と, ま た this cell に Maxi - Cl を activeness さ せ る low stimulation を zhang with え て も PG conveying active が ほ と ん ど variations change し な い こ と を shows し た. さ ら に, Maxi - Cl activeness に must な ア ク セ サ リ ー タ ン パ ク mass ANXA2 / S100A10 を heritage 伝 son owe loss さ せ て も PG function が sustain さ れ た こ と か ら, こ れ ら は PG conveying に must で な い こ と も Ming ら か に な っ た. し た が っ て, SLCO2A1 は PG ト ラ ン ス ポ ー タ ー と し て function of geomagnetic し な が ら, specific の stimulus に 応 じ て Maxi - Cl active を 発 now す る membrane タ ン パ ク qualitative で あ る こ と が shown さ れ た. こ の ほ か beyond 2022 annual は, ANXA2 / S100A10 の Maxi - Cl ア ク セ サ リ ー タ ン パ ク qualitative exploration の た め の FLAG タ グ combining SLCO2A1 を 発 now cells build し た. FLAG antibody を resistance with い た immune sink method に よ り, less な く と も SLCO2A1 と ANXA2 の combining が confirm で き た た め, future は immune sink サ ン プ ル に つ い て プ ロ テ オ ミ ク ス parsing を be し, unknown の Maxi - Cl ア ク セ サ リ ー タ ン パ ク qualitative exploration お よ び interaction メ カ ニ ズ ム の interpret に り Group む set である.

项目成果

期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
高崎健康福祉大学薬学部 分子動態制御学研究室ウェブページ
高崎保健福祉大学药学部分子动力学控制实验室网页
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
N型糖鎖修飾によるプロスタグランジン膜輸送体SLCO2A1の細胞内局在変動
N-糖基化导致前列腺素膜转运蛋白 SLCO2A1 细胞内定位的变化
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    中村 吉伸;相澤 千里;川田 日向子;中西;猛夫
  • 通讯作者:
    猛夫
SLCO2A1欠損によるブレオマイシン誘発性炎症増悪の分子機序
SLCO2A1缺陷导致博来霉素致炎症加重的分子机制
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    中西 猛夫;Shumba N. Melody;中村 吉伸
  • 通讯作者:
    中村 吉伸
N-glycosylation modifies prostaglandin E2 uptake by reducing cell surface expression of SLCO2A1
  • DOI:
    10.1016/j.prostaglandins.2023.106714
  • 发表时间:
    2023-01-28
  • 期刊:
  • 影响因子:
    2.9
  • 作者:
    Nakamura,Yoshinobu;Aizawa,Chisato;Nakanishi,Takeo
  • 通讯作者:
    Nakanishi,Takeo
プロスタグランジン膜輸送体SLCO2A1の細胞内局在におけるN型糖鎖修飾の役割
N-糖基化在前列腺素膜转运蛋白 SLCO2A1 细胞内定位中的作用
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    中村 吉伸;相澤 千里;川田 日向子;中西;猛夫
  • 通讯作者:
    猛夫
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  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    川嶋 永人;眞山 博幸;中村 吉伸;藤井 秀司
  • 通讯作者:
    藤井 秀司
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
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  • 通讯作者:
    玉井 郁巳
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  • DOI:
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    2012
  • 期刊:
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  • 作者:
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    野口 賢至,河原 成元
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  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
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  • 通讯作者:
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高齢脳血管疾患患者における摂食嚥下機能と開口力の関係
老年脑血管病患者吞咽功能与张口力的关系
  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    中村 吉伸;松山 美和;大村 智也;渡辺 朱理;東田 武志
  • 通讯作者:
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