甲状腺オルガノイドを用いた先天性甲状腺機能低下症の病態解明と新たな治療戦略の確立
阐明先天性甲状腺功能减退症的病理学并利用甲状腺类器官建立新的治疗策略
基本信息
- 批准号:22K15690
- 负责人:
- 金额:$ 3万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
先天性甲状腺機能低下症の病態解明を目的として、甲状腺オルガノイドを用いた機能解析系の確立とその治療応用に対する研究課題であるが、甲状腺オルガノイドについては免疫染色でPax8、Tgといった遺伝子の発現を認め、甲状腺濾胞細胞と類似したキャラクタリゼーションを確認した。さらにZO1による免疫染色で極性の評価を実施したところ、甲状腺オルガノイドにおける内腔がいわゆる濾胞に相当することを確認し、解剖学的にも生体内における甲状腺の特性を十分保有しているモデルを確立することができた。試験管内で甲状腺に類似したモデルを精度高く樹立可能であることは、生体内に近い条件での機能評価に大きく貢献するものと考えている。また、Slc26a4、Slc26a7ノックアウト(KO)マウスからも同様の手法で甲状腺オルガノイドを作成することができた。先天性甲状腺機能低下症のモデルマウスから甲状腺オルガノイド作成をした報告は本研究が初めてであり、甲状腺疾患の病態解明に結びつく重要なステップであると考える。しかしながら、甲状腺オルガノイドをマウスの腎皮膜下に野生型マウスから作成した甲状腺オルガノイドを移植し、マウスの甲状腺機能の変化、腎皮膜下での甲状腺オルガノイドの組織学的な機能評価を実施したが、手技的な問題もあり十分な評価はできなかった。マウス甲状腺から甲状腺オルガノイドを作成し、レンチウイルスベクターを用いてVenusを発現させたところ問題なく遺伝子導入が可能であることが確認できた。次にSlc26a7とVenusが共発現をするベクターを構築し、その遺伝子発現効率を評価したが、十分な導入効率は得られていない。ヒトでの遺伝子治療を想定したiPS細胞を使用した実験には着手できていないが、既報の論文に従って今後構築を計画したい。
Congenital thyroid function lowly disease の pathological interpret を purpose と し て, thyroid オ ル ガ ノ イ ド を with い た function resolution is の establish と そ 応 の treatment with に す seaborne る research topic で あ る が, thyroid オ ル ガ ノ イ ド に つ い て は immune dyeing で Pax8, Tg と い っ た posthumous son 伝 の 発 を now recognize め, thyroid follicular cell と similar し た キ ャ ラ ク Youdaoplaceholder0 タリゼ ショ ショ を を confirm た. さ ら に ZO1 に よ る immune dyeing で polarity の review 価 を be applied し た と こ ろ, thyroid オ ル ガ ノ イ ド に お け る lumen が い わ ゆ る follicular に quite す る こ と を confirm し, anatomy of に も born in vivo に お け る thyroid の features を very keep し て い る モ デ ル を establish す る こ と が で き た. Test tube で thyroid に similar し た モ デ ル を high precision く may establish で あ る こ と は, born in vivo に nearly い condition で の function evaluation 価 に big き く contribution す る も の と exam え て い る. ま た, Slc26a4, Slc26a7 ノ ッ ク ア ウ ト (KO) マ ウ ス か ら も with others の gimmick で thyroid オ ル ガ ノ イ ド を made す る こ と が で き た. Congenital thyroid function lowly disease の モ デ ル マ ウ ス か ら thyroid オ ル ガ ノ イ ド made を し は た report at the beginning of this study が め て で あ り の, thyroid disease pathological interpret に knot び つ く important な ス テ ッ プ で あ る と exam え る. し か し な が ら, thyroid オ ル ガ ノ イ ド を マ ウ ス の renal epithelium under に wild-type マ ウ ス か ら made し た thyroid オ ル ガ ノ イ ド し を transplantation and マ ウ ス thyroid の の variations, the renal epithelium under で の thyroid オ ル ガ ノ イ ド の histological な function evaluation 価 を be applied し た が, manipulation of な も あ り very な review 価 は で き な か っ た. マ ウ ス thyroid か ら thyroid オ ル ガ ノ イ ド を し, consummate レ ン チ ウ イ ル ス ベ ク タ ー を with い て Venus を 発 now さ せ た と こ ろ problem な く posthumous son 伝 import が may で あ る こ と が confirm で き た. Time に Slc26a7 と Venus が 発 now total を す る ベ ク タ ー を constructing し, そ の posthumous son 伝 発 now working rate を review 価 し た が, very な import working rate は ら れ て い な い. を ヒ ト で の heritage 伝 son treatment scenarios し た iPS cells use を し た be 験 に は to で き て い な い が, both reported の thesis に 従 っ て in future build を project し た い.
项目成果
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