Early predictive diagnosis of oncogene mutation group by FDG-PET / CT

当初、KRAS変異のあるNIH3T3細胞と遺伝子変異のないNIH3T3細胞で、mRNA以外にもグルコース代謝キットを用いて、糖代謝の変化を見たところ、やはりKRAS変異がある細胞で、より蛍光発色を認めた。ヒト細胞でも上記と同様のことがいえるか、HepG2細胞を用いて、グルコース代謝に関わるGLUTのmRNAを用いて、評価したが、予想していた事とは、逆の結果で発現が減る現象が起こった。原因として、HepG2細胞はもともとがん細胞であることもあり、このがん自体での糖代謝が高かった可能性が考えられた。今回の実験の目的として、正常細胞から悪性化した場合に、糖代謝が高くなるかどうかを検証することであり、実験で用いている細胞を変更する必要があった。肺の気管支上皮細胞が、遺伝子変異をする場合に糖集積は、FDG集積が目立つことは知られていて、気管支上皮細胞を用意した。その為、まず肺のヒト正常細胞を実際に購入し、一過性の発現変異細胞をつくり、グルコース代謝に関わるGLUT1～5のmRNAを用いて、糖代謝が盛んになるか、現在評価しているところである。変異細胞については、グルコース代謝に関わるp53/AKT/RAS変異させ、実験を進めている。上記細胞で、確かなmRNAを確認した場合は、stable細胞に変更し、次段階のネズミに注入し、ネズミ用のFDG-PET/CTで評価をもちいる予定だ。そして、NIH3T3にtransient発現で、実際にKRAS変異した細胞、AKT変異した細胞も、グルコース代謝に関わるGLUT1～5のmRNAを用いて、糖代謝が盛んになるか、調べているところである。

当初、KRAS変異のあるNIH3T3細胞と遺伝子変異のないNIH3T3細胞で、mRNA以外にもグルコース代謝キットを用いて、糖代謝の変化を見たところ、やはりKRAS変異がある細胞で、より蛍光発色を認めた。ヒト細胞でも上記と同様のことがいえるか、HepG2細胞を用いて、グルコース代謝に関わるGLUTのmRNAを用いて、評価したが、予想していた事とは、逆の結果で発現が減る現象が起こった。原因として、HepG2細胞はもともとがん細胞であることもあり、このがん自体での糖代謝が高かった可能性が考えられた。今回の実験の目的として、正常細胞から悪性化した場合に、糖代謝が高くなるかどうかを検証することであり、実験で用いている細胞を変更する必要があった。肺の気管支上皮細胞が、遺伝子変異をする場合に糖集積は、FDG集積が目立つことは知られていて、気管支上皮細胞を用意した。その為、まず肺のヒト正常細胞を実際に購入し、一過性の発現変異細胞をつくり、グルコース代謝に関わるGLUT1～5のmRNAを用いて、糖代謝が盛んになるか、現在評価しているところである。変異細胞については、グルコース代謝に関わるp53/AKT/RAS変異させ、実験を進めている。上記細胞で、確かなmRNAを確認した場合は、stable細胞に変更し、次段階のネズミに注入し、ネズミ用のFDG-PET/CTで評価をもちいる予定だ。そして、NIH3T3にtransient発現で、実際にKRAS変異した細胞、AKT変異した細胞も、グルコース代謝に関わるGLUT1～5のmRNAを用いて、糖代謝が盛んになるか、調べているところである。