炎症性大腸発癌の浸潤能獲得機序におけるCXCL16の役割解明

阐明CXCL16在炎症性结直肠癌发生中获得侵袭能力的机制中的作用

• 批准号: 22K16025
• 负责人: 平山 大輔
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16025/
• 关键词: CXCL16; 潰瘍性大腸炎; 炎症性発癌; ケモカイン; 大腸癌

潰瘍性大腸炎(UC)の患者数は年々増加しており、それに伴い大腸癌合併症例も増加している。大腸炎症により想起された炎症性大腸発癌(CAC)は早期に粘膜下層に浸潤する特徴を持ち、発癌予防や早期発見のためにCACの発癌機序の解明は重要な課題である。ケモカインの1つのCXCL16が大腸炎進展において重要な役割を持つことは既に報告されているが、CXCL16とCACの関連についての検討は、いまだに国内外でなされていない。そのため本研究では、大腸炎症やCACにおけるCXCL16の役割/機序の解明を目的とした。ヒト大腸癌細胞株(Caco2, Lovo, DLD-1)に対し、RNAi法を用いてCXCL16の発現を低下させてScratch assayとInvasion assayを行い、腫瘍の遊走能および浸潤能に対するCXCL16の影響を検討した。その結果、CXCL16の低下の有無で上記に差は認めなかった。マウス骨髄移植モデルを用いて急性腸炎におけるCXCL16の役割を検討した。腸管上皮と抗原提示細胞に発現しているCXCL16の機能を別個に分けて検討するため、CXCL16 KOマウス及び野生型(wild-type: WT) マウスに対し致死的放射線照射を行った後に、それぞれのドナーマウスの大腿骨及び脛骨から採取した骨髄細胞を尾静脈注射にて移植し、骨髄キメラマウス2群と対照群2群を作製した(WT→WT、WT→KO、KO→WT、KO→KO)。次に各マウスに対し、4%DSSの経口投与（1週間投与、2週間休薬）を1サイクル施行することにより急性腸炎を誘導し腸炎の程度について検討を行った。その結果、抗原提示細胞のCXCL16が発現していないKO→WT群とKO→KO群において、腸炎による体重減少,下痢,血便の程度が強い結果となった。これにより、CXCL16は発現部位によってその役割が異なる事が示唆された。

溃疡性结肠炎（UC）的患者数量逐年增加，因此，结肠癌并发症的病例也在增加。结肠炎症召回的炎症性结肠癌（CAC）具有早期入侵粘膜下层的特征，并且阐明CAC发病率是预防和早期发现癌变的重要问题。尽管已经报道说，CXCL16是趋化因子之一，在结肠炎发育中起着重要作用，但尚未考虑CXCL16和CAC之间的关系，尚未在国内和国际上进行。因此，这项研究旨在阐明CXCL16在结肠炎症和CAC中的作用/机制。在人类结肠癌细胞系（CACO2，LOVO，DLD-1）上，我们通过使用RNAi方法降低CXCL16的表达进行了刮擦和入侵测定，并研究了CXCL16对肿瘤迁移和入侵能力的影响。结果，在上述存在或不存在CXCL16的降低中未观察到差异。使用小鼠骨髓移植模型研究了CXCL16在急性肠炎中的作用。要分别检查在肠上皮和抗原呈递细胞中表达的CXCL16的功能，将致死辐射应用于CXCL16 KO小鼠和野生型小鼠和野生型小鼠（WT）小鼠，骨髓细胞从每个供体小鼠的雌性和tibia植入了两组骨骼的骨膜和乳头，则是静脉内部的两组骨骼培养的组合，并植根于两组，骨髓均受到骨骼的裂缝，培养了两组的成群。 （WT→WT，WT→KO，KO→WT，KO→KO）。接下来，用4％的DSS（1周给药，2周）口服每只小鼠以诱导急性肠炎，并检查了肠炎的程度。结果，在KO→WT组和KO→KO组中，体重减轻，腹泻和血腥粪便的严重程度很强，那里未表达CXCL16，未表达CXCL16。这表明CXCL16取决于表达部位。