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シングルセルRNAシークエンスを用いた加熱式タバコの長期曝露による肺傷害の解析

使用单细胞 RNA 测序分析长期接触加热烟草导致的肺损伤

基本信息

批准号：
22K16178
负责人：
鈴木洋平
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Juntendo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

これまでに我々は、慢性タバコ煙曝露に関する肺傷害の解析システムを加熱式タバコに応用し、加熱式タバコの長期曝露が生体に与える影響について研究を行ってきた。本邦で最多のシェアをもつIQOSを用いてマウスに6か月の長期曝露を行った結果、IQOSエアロゾルの長期曝露により、燃焼式タバコと同等の肺気腫を生じ、その機序としてアポトーシスが深く関与していることを見出した。そこで、IQOS曝露を行ったマウス肺組織に対してシングルセルRNA-seq解析を行うことで、肺気腫発症機序をより詳細に分析することを目論み、本研究を実施した。6か月間の曝露実験を行った対照群、IQOS群、CS群から1匹ずつ、合計3検体のマウス右全肺をシングルセルRNAシークエンス解析に供した。3検体の合計、21717個の細胞に対して解析を行った結果、31種類のクラスタが同定された。クラスタリング結果から推定される各クラスタに対応する細胞種分布を解析した。さらに、対照群、IQOS群、CS群の各群でクラスタ毎の細胞比構成を解析した。その結果、IQOS 群では他の群と比較して、naive CD4 T 細胞, B 細胞, 間質マクロファージの一部の細胞数が増加しており、CS 群では他の群と比較して肺胞マクロファージ, 好中球の細胞数が増加しているという結果を得た。しかしながら、細胞腫分布を分析した結果、気道上皮細胞など肺組織の構成細胞の絶対数が既報と比較してかなり少ないことがわかり、肺組織の分散方法を見直す必要があると考えられた。

This study was conducted to investigate the biological effects of chronic smoke exposure on lung injury. In this country, the highest number of IQOS was found in the long-term exposure results of 6 months. The long-term exposure results of IQOS were found in the long-term exposure results of 6 months. The corresponding pulmonary edema occurred in the combustion mode. The mechanism of the long-term exposure was found in the deep relationship between the long-term exposure results and the long-term exposure results. This study was carried out to analyze the mechanism of lung cancer in detail. 6 months of exposure to the group, IQOS group, CS group, a total of 3 samples of the right lung, the group RNA analysis Total of 3 samples, 21717 cells, 31 types of samples, were analyzed. Analysis of cell species distribution for each species estimated from the results of classification The cell ratio of each group was analyzed. The number of cells in the IQOS group and other groups increased compared with those in the CS group. The number of cells in the CD4 group increased compared with those in the CS group. The results of the analysis of the distribution of lung tissue and the number of cells constituting lung tissue were compared. The method of dispersion of lung tissue was studied.