リン酸化酵素DYRK2に着目した膵臓癌転移の機序解明と革新的治療法の開発

阐明胰腺癌转移机制并开发以激酶DYRK2为重点的创新治疗方法

• 批准号: 22K16470
• 负责人: 堀内 尭
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16470/
• 关键词: DYRK2; EMT; アデノウィルスベクター; アデノウィルス; 膵癌

本研究では、膵臓癌においてDYRK2を介した転移・浸潤の分子生物学的メカニズムを明らかにすることであり、さらに膵臓癌に対する新たな革新的治療戦略の糸口を確立することである。DYRK2 は、発現低下によって ①細胞周期の制御に必須な転写因子c-Junやc-Mycの蓄積を引き起こし細胞増殖が亢進すること、②転写因子KLF4発現を誘導し癌幹細胞の増加をもたらすこと、 ③上皮間葉転換(EMT)の転写因子Snail発現亢進によりEMTを誘導することが報告されており、膵臓癌の進行や転移・浸潤にも影響を与えている可能性が強く示唆されるが、そのメカニズムを検討した研究は少ない。また、DYRK2を過剰発現させた場合の膵臓癌の進展に関しても報告が少なく、申請者はDYRK2を過剰発現させることで膵臓癌のEMTや転移能を抑制すると仮説した。今回我々は、ヒト膵臓癌細胞株においてDYRK2遺伝子に対するshRNAを用いてDYRK2をノックダウンさせ、Migration assayやInvasion assayを用いて評価を行う。また、Western blot法やRTPCR法を用いて以下に示すEMT関連蛋白(Snail, E-cadherin, Vimentin)や接着・浸潤に関する蛋白 (MMP-9, ICAM-1, VCAM-1)を評価する。DYRK2をノックダウンさせた膵臓癌細胞株の遺伝子変化を転移に関する遺伝子を中心にマイクロアレイで網羅的に解析する。

This study establishes a new and innovative therapeutic strategy for cancer in the molecular biology of DYRK2-mediated migration and invasion. DYRK2 expression is reduced by (1) accumulation of the transcription factors c-Jun and c-Myc necessary for cell cycle regulation,(2) induction of transcription factor KLF4 expression, and (3) induction of epithelial mesenchymal transition (EMT) by transcription factor Snail. The possibility of cancer progression and invasion is strongly demonstrated. In the event of DYRK2 discovery, the progress of cancer is reported, and the applicant's DYRK2 discovery is reported, and the EMT migration of cancer is suppressed. We now evaluate the use of DYRK2 shRNA in response to DYRK2 gene expression in cancer cell lines, migration assay, and invasion assay. Western blot and RTPCR methods were used to evaluate EMT-associated proteins (Snail, E-cadherin, Vimentin) and proteins associated with subsequent infiltration (MMP-9, ICAM-1, VCAM-1). DYRK2 gene expression in cancer cell lines