Development of a biomarker for predicting the efficacy of cancer chemoimmunotherapy using telomere length

开发利用端粒长度预测癌症化学免疫疗法疗效的生物标志物

• 批准号: 22K16812
• 负责人: 細越 正吾
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16812/
• 关键词: テロメア; 免疫療法; バイオマーカー; テロメア長

固形腫瘍に対する癌免疫療法は実臨床でも多くの患者に使用されているが、多くの患者には奏功せず、重篤な免疫関連有害事象も大きな問題である。有効な分子マーカーも発見されておらず、現状では免疫療法の効果を予測することは困難である。そこで我々は免疫細胞のストレス状態が免疫療法の効果に重要な役割を果たしているのではないかと考えた。近年白血球を用いたテロメア長の測定が可能となり、白血球細胞のテロメア長から長期的なストレスが、テロメアGテールから短期的なストレスが推測できるようになった。現在、免疫細胞の疲弊を評価する方法は開発されておらず、これらテロメア長を用いたツールが免疫細胞のストレス負荷を評価し免疫療法の効果を予測できる可能性がある。本研究では免疫細胞のテロメアとテロメアGテールを用いて癌免疫療法の効果を予測するバイオマーカーの開発を目指すと同時に、癌患者における白血球テロメア長の意義も検討する。本年度は93例の血液サンプルを収拾し、以下の方法でテロメア測定を行った。検体の内訳は健常コントロール11名、前立腺癌2名、腎細胞癌36名、尿路上皮癌44名である。現在、治療効果情報と紐づけしており、結果の取りまとめを行っている。１）染色体DNAの精製後、100 ng/uL DNA溶液を95℃で10分間熱変性させ、5分間氷中に放置した。その後、200 ng/10uLになるように希釈したDNA溶液にアクリジュームエステルで標識した29-merのテロメアプローブが入ったハイブリダイゼーション溶液10uLを加え、60℃で10分間反応させた。その後、加水分解溶液30uLを加え、60℃で10分間反応させ過剰量のDNAに結合しなかったテロメアプローブを加水分解した。40 uLを96ウエルホワイトプレートに分注し、過酸化水素水溶液20uLと水酸化ナトリウム溶液10 uLを添加し、DNAに結合したテロメアプローブ量を発光量としてEnVision機器にて測定した。

The method of cancer immunity, cancer immunity, cancer immunity. There are some molecules that don't know what to do, and immune methods that don't tell you what to do. The immune status of the immune system is very important. The fruit is important. In recent years, white blood cells have been used to determine the long-term and short-term growth rates of white blood cells and white blood cells. At present, the immune system has been used in many ways, and the immune system has been used for a long time to determine the possibility of immune response. In this study, the immune system was used to detect the number of white blood cells (WBC). In this study, we used the method of cancer immunoassay to treat the patients with cancer at the same time. This year, 93 cases of blood samples were collected, and the following methods were used to determine the blood samples. There were 11 cases of normal adenocarcinoma, 2 cases of anterior adenocarcinoma, 36 cases of adenocarcinoma and 44 cases of urothelial carcinoma. At present, the results of the treatment report on the situation, and the results are selected. 1) chromosomal DNA spermatozoa, 100 ng/uL DNA solution at 95 ℃ for 10 minutes, 5 minutes for sex and 5 minutes for sperm placement. After that, 200 ng/10uL solution was required to increase the concentration of 10uL in the solution at 60 ℃ and 10 minutes. After that, the label 29-mer was added to the 10uL solution. After adding water decomposition solution, 30uL was added, and the amount of DNA in the range of 60 ℃ to 10 minutes was combined with the addition of water decomposition solution. 40 uL, 96 uL, 10 min, 10 min, 40 min, 96 min, 96 min, 40 min, 96 min, 10 uL, 12 min, 10 min, 12 min, 10 min