次世代シーケンシング解析による子宮内膜再生microRNAの同定と創薬基盤開発

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本研究は脂肪幹細胞上清に含まれる、子宮内膜着床不全を治癒するmicroRNAを同定することを目的とし、1) Small RNA-Seq解析、mRNA-Seq解析による子宮内膜再生microRNAの同定、2) ヒト子宮内膜間質細胞と子宮内膜菲薄化マウスを用いたmicroRNAの子宮内膜再生能評価、3) ボナック核酸の作製と子宮内膜菲薄化マウスに対する薬効、細胞内動態解析を実施する。細胞は継代を重ねるごとに老化し、分化能力が低下する。マウス脂肪幹細胞もまた、継代を重ね、分化能力が低下するほど、子宮内膜再生能力が低下することが予測される。本年度は、高い分化能力を保持した3継代目、および分化能力が低下した20継代目におけるマウス脂肪幹細胞の上清をsmall RNA-Seq解析することで、3継代目の上清にて有意に発現上昇しているmicroRNAを10種程度同定することに成功した。また、子宮内膜菲薄化マウス作製のための最適なエタノール投与量を決定し、さらに、マウス子宮内膜のHE染色画像から子宮内膜の厚みを測定する方法を決定したことで、microRNAの子宮内膜再生効果を正確に検証する方法を確立した。来年度以降は、モデルマウスの子宮組織をRNA-Seq解析し、その発現パターンと同定したmicroRNAの関係性を確認すると共に、実際に、同定したmicroRNAを子宮内膜菲薄化モデルマウスへ投与することで、子宮内膜の厚さ、および血管新生関連遺伝子の発現、受精卵の着床率を調べることで、子宮内膜再生効果を検証する。