权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

プラストシアニンの銅原子取り込み過程における分子シャペロンの役割

分子伴侣在质体蓝素铜原子摄取过程中的作用

基本信息

批准号：
09780613
负责人：
日比野隆
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Meijo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

1. 耐塩性ラン藻Aphanothece halophyticaの分子シャペロン(DnaK)およびプラストシアニン(前駆体および成熟体)を大腸菌で発現させ、精製した。(1) 大腸菌で発現させたDnaKは、大腸菌を破壊した後、硫酸アンモニウム分画を行い、陰イオン交換およびゲル濾過クロマトグラフィーにより、精製した。(2) 成熟体プラストシアニンは、大腸菌のペリプラズマ画分を回収した後、硫酸アンモニウム分画を行い、陰イオン交換クロマトグラフィーにより、精製した。(3) 前駆体プラストシアニンは、大腸菌の不溶性画分を同収した後、尿素で可溶化、尿素存在下でゲル濾過クロマトグラフィーを行い、精製した。2. 精製した分子シャペロン(DnaK)の生化学的性質を検討した。耐塩性ラン藻A.halophyticaのDnaK蛋白質が現在報告されているDnaK蛋白質と同じATPase活性,蛋白質フォールディング活性を示すのかどうか検討したところ、ATPase活性,蛋白質フォールディング活性のいずれにおいても、極めて高い塩濃度(1M NaCl,KCl)でも活性を示すことが明らかになった。3. 精製したプラストシアニンへの銅原子取り込みに分子シャペロンが関与するかどうか検討した。結果、変性剤で変性させたプラストシアニンをDnaKの存在する溶液に希釈することにより銅原子取り込みが生じることを分光法で明らかにした。以上の結果について、学術論文を作成している。Molecular characterization of DnaK from a halotolerant cyanobacterium Aphanothece halophytica for ATPase,protein folding,and copper binding under various salinity conditions, Plant Mol.Biol.,in press.(1999)

1. The molecules of Aphanothece halophytica (DnaK) are resistant to malathion. The precursors are mature, and the bacteria are isolated. The main results are as follows: (1) after the bacteria broke the DnaK, the sulfuric acid solution was used to separate the drawing lines, and the samples were collected. (2) after the mature body is full-blown, the fungus is divided into two parts, and the sulfuric acid solution is used to separate the drawing lines and communicate with each other. (3) in the presence of urea, and in the presence of urea. two。 The molecular and biochemical properties of DnaK are highly sensitive. Tolerance to A.halophytica DnaK protein is now reported that DnaK protein is the same as ATPase activity, protein protein activity is the same as ATPase activity, protein protein activity is similar to ATPase activity, protein protein activity is similar to ATPase activity, protein protein activity is the same as that of ATPase protein, protein and protein protein is the same as that of ATPase, protein, protein and protein. 3. In the first place, the atoms are taken from the atoms, the molecules, the molecules, and the molecules. Results: the results show that there is a solution for the determination of atoms in DnaK. The method of spectrophotometry is sensitive to the detection of atoms. As a result of the above results, the academic papers and academic papers have been written successfully. Molecular characterization of DnaK from a halotolerant cyanobacterium Aphanothece halophytica for ATPase,protein folding,and copper binding under various salinity conditions, Plant Mol.Biol.,in press. (1999)