DnaK遺伝子導入による植物の高温耐性および耐暑性の向上に関する研究

导入DnaK基因提高植物耐高温、耐热性的研究

• 批准号: 12740444
• 负责人: 日比野 隆
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Meijo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12740444/
• 关键词: シャペロニン; DnaK; 耐塩性ラン藻; 遺伝子導入タバコ; 遺伝子導入イネ; シャぺロニン; Aphanothece halopytica

1.耐塩性ラン藻の熱ショックタンパクdnaK(hsp70)遺伝子導入植物の作出(1)dnaK遺伝子をバイナリーベクターに組み込み、アグロバクテリウム感染法を用いてタバコに導入した。dnaK遺伝子は、強力な35Sプロモーターで常時発現でき、遺伝子導入植物は、カナマイシン耐性で選抜できるようにデザインした。(2)dnaK遺伝子の転写レベル・発現レベルの高い形質転換タバコをノーザンブロッテング・ウエスタンブロッテングの手法により選抜した。(3)上記と同様の手法で、dnaK遺伝子導入イネを作出・選抜した。なお、dnaK遺伝子導入イネについては、ハイグロマイシン耐性で選抜できるようにデザインした。2.dnaK(hsp70)遺伝子を導入した形質転換タバコ・イネの高温耐性の検定(1)高温下における発芽率dnaK遺伝子を導入した形質転換株、および野生株タバコの発芽率は、27℃条件で発芽させると、形質転換株および野生株タバコの発芽率は同じであったが、40℃条件で発芽させた場合、野生株タバコの発芽率は26.7%、形質転換株は81.7%が発芽した。(2)高温下における光合成活性形質転換株、および野生株タバコの上位葉・下位葉の光合成活性を測定した結果、上位葉で特に野生株タバコの活性が低下するのに対し、形質転換株は40℃処理6日間でも活性の低下は全く見られなかった。一方・下位葉ではどちらも活性は低下したが、形質転換株の方が失活速度が抑制された。(3)高温下における水分含量形質転換株、および野生株タバコの上位葉・下位葉の水分含量を測定した。上位葉・下位葉いずれにおいても水分含量は、形質転換株の方が野生株タバコより高く保たれていた。(4)dnaK(hsp70)遺伝子を導入したイネの高温耐性の検定上記の『形質転換タバコの高温耐性の検定』と同様,高温条件下における(1)発芽率、(2)光合成活性、(3)水分含量などの加えて、(4)生殖成長期において高温耐性が向上しているかどうかについても検討している。

1. Salt resistance ラ ン algal の hot シ ョ ッ ク タ ン パ ク dnaK (hsp70) posthumous son 伝 の import plants make (1) dnaK posthumous son 伝 を バ イ ナ リ ー ベ ク タ ー に group み 込 み, ア グ ロ バ ク テ リ ウ ム を infection method with い て タ バ コ に import し た. DnaK heritage 伝 は, powerful な 35 s プ ロ モ ー タ ー で geomagnetic 発 now で き, heritage 伝 は import plants, カ ナ マ イ シ ン patience で choose sorting で き る よ う に デ ザ イ ン し た. (2) dnaK posthumous son 伝 の planning write レ ベ ル · 発 now レ ベ ル の high い form quality planning in タ バ コ を ノ ー ザ ン ブ ロ ッ テ ン グ · ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ テ ン グ の gimmick に よ り choose sorting し た. (3) The above is recorded as と. The same technique is で, and the dnaK remnant is 伝. It is introduced into 伝 ネを and selected as た. な お, dnaK but 伝 import イ ネ に つ い て は, ハ イ グ ロ マ イ シ ン patience で choose sorting で き る よ う に デ ザ イ ン し た. 2. DnaK (hsp70) posthumous son 伝 を import し た form quality planning in タ バ コ · イ ネ high-temperature corrosion-resistant の の 検 set (1) high temperature に お け る 発 bud rate dnaK posthumous son 伝 を import し た form quality planning in plants, お よ び wild strains タ バ コ の 発 は bud rate, 27 ℃ condition で 発 bud さ せ る と, form quality planning in plant お よ び wild strains タ バ コ の 発 は bud rate with じ で あ っ た が, 40 ℃ condition で 発 bud さ せ た occasions, wild strains タ バ コ の 発 は bud rate 26.7%, form quality planning in plant は 81.7% が 発 bud し た. (2) high temperature に お け る photosynthetically active form quality planning in plants, お よ び wild strains タ バ コ の upper leaves, lower leaves の determination of photosynthetic activity を し た results, upper lobe で に wild strains タ バ コ の active low が す る の に し seaborne, character planning in 40 ℃ strains は 処 principle 6 daytime で も active low の は く see all ら れ な か っ た. The activity of the lower leaf of one party is で, <s:1>, ちら, ちら, <s:1>, and the inactivation rate of the <s:1> party of shape and mass 転 is が inhibited された. (3) Determination of <s:1> moisture content を of <s:1> upper and lower leaves of <s:1> wild plants under high temperature における moisture content shape and quality 転 transplanting plants and および wild plants タバコ <s:1> <s:1> determination of <s:1> moisture content を た た. The water content of the upper leaf and the lower leaf is ずれにお て て て, the shape and quality are 転, and the <s:1> wild plant が of the transplanting method is タバコよ <s:1> higher and く more likely to retain たれて た た た た た た た. (4) dnaK (hsp70) posthumous son 伝 を import し た イ ネ high-temperature corrosion-resistant の の 検 set written の "form quality planning in タ バ コ high-temperature corrosion-resistant の の 検" と with others, under the condition of high temperature に お け る 発 bud rate (1), (2) the photosynthetic activity, (3) moisture content な ど の plus え て, (4) the reproductive growth に お い high-temperature corrosion-resistant が て upward し て い る か ど Youdaoplaceholder0 に に に て て 検 検 ask for て て る る.