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ウニ初期胚における Homeobox 遺伝子の機能の解析

早期海胆胚胎同源盒基因的功能分析

基本信息

批准号：
09780677
负责人：
弥益恭
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Saitama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

動物の基本的体制の確立において、様々なHomeodomainタンパク質が胚体内の位置情報を与えることで胚体の領域化を行い、さらに器官、組織の分化を決定すると考えられている。近年、新しい型のHomeodomainタンパク質をコードする遺伝子としてGbx1/2が見いだされており、脊椎動物においては、脳の形成に関与することが示唆されている。本研究者は、脊椎動物とともに後口動物に属するウニ(ムラサキウニ)より、RT-PCR法を用いてGbxl/2相同遺伝子由来と考えられる部分cDNAを得ていた(AcGbx)。この遺伝子のウニ胚における時間的および空間的な発現調節、さらに初期発生における役割を検討することは、ウニ初期発生の機構の理解のみならず、後口動物の進化、とくに脊椎動物で顕著となる中枢神経系の確立の過程を知る上で興味深い。これまで、得られたAcGbx部分cDNAをプローブとしてcDNAのクローニングを試みたが、完全長cDNAの単離には至っていない。そこで、RACE法によるcDNAの単離を進めており、これまで、3'側のcDNA断片を増幅することに成功している。さらに5'-RACEを行うことでcDNA全体の構造が決定されると期待される。胚発生におけるAcGbx遺伝子の発現をRT-PCR法により検討したところ、原腸形成期に発現が始まり、プルテウス期まで転写産物が増大することが明らかとなった。発現組織についてはWhole-mount in situ hybridizationにより検討を進めている。その一方で、約15kbのAcGbxゲノムクローンを得ており、その配列をcDNA配列と比較することにより、AcGbx遺伝子の全構造の解明が進行中である。また、転写調節に関わるDNAの領域についても検討を進めている。

The basic structure of animals is established in the body of the embryo. It is determined by the fieldization of the embryonic body and the differentiation of organs and tissues. In recent years, the new type of Homeodomain is of high quality, and the quality of the new homeodomain is Gbx1/ 2. が见いだされており, vertebrate においては, 脳の成に关 and することが向されている. The present researcher used the method of RT-PCR for vertebrate deuterostomes and genus するウニ(ムラサキウニ) We used the same genetic material as いてGbxl/2 and obtained ていた (AcGbx) by testing part of the cDNA of えられる. The present adjustment of the space of the time and space , さらにInitial 発生におけるServant cut を検多することは、ウニInitial 発The understanding of the mechanism of life, the evolution of deuterostomes, the evolution of vertebrates, and the establishment of the central nervous system are both interesting and interesting.これまで、GET られたAcGbx partial cDNA をプローブとしてcDNAのクローニングを trial みたが, complete length cDNA の単里には to っていない.そこで, RACE method, cDNA separation, 3'-side cDNA fragmentation, 3' side cDNA fragmentation, and 3' side cDNA fragmentation, success.さらに5'-RACEを行うことでThe overall structure of cDNA is decided and expected. Embryonic 発生におけるAcGbx 缝子の発 appear をRT-PCR method により検 Discussion したところ, gastrula In the formation period, it is the beginning of the show, and in the period of development, the product is written in the form of the product. The organization is now in full swing. Whole-mount in situ hybridization is in place.その一方で、About 15kbのAcGbxゲノムクローンを得ており、その配arrayをcD The comparison of the NA arrangement and comparison, and the explanation of the complete structure of the AcGbx legacy are in progress.また,転WRITING regulates the field of に关わるDNAのについも検検を入めている.