化学シナプスの情報単位の一つである神経分泌顆粒形成とその制御メカニズムの解明

阐明化学突触信息单位之一的神经分泌颗粒的形成及其控制机制

• 批准号: 09780667
• 负责人: 大橋 正人
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780667/
• 关键词: 神経分泌顆粒形成; 小胞輸送; ホスホイノシチド; トランスゴルジネットワーク; 細胞骨格

我々は以前、哺乳類のホスファチジルイノシトール(PI)移送蛋白質(PI-TP)が、トランスゴルジネットワーク(TGN)からの神経分泌顆粒形成を促進する細胞質因子であることを見いだし、さらに、TGNからの神経分泌顆粒形成におけるPI-TPと共同して働く脂質膜上因子としてのPIの本質的な関与と、細胞質側因子としてのアクチン系の潜在的な関与を示唆した。今年度は第一に、このPI系の機能発動における一連のカスケードに作用する可能性のある細胞質側因子として、神経分泌顆粒形成を制御することが知られている三量体型Gタンパク質の関与を以前に確立したPC12細胞に由来する無細胞アッセイ系を用いて検討した。細菌由来のmonoPI特異的ホスホリパーゼC(PI-PLC)と、三量体型Gタンパク質に作用することで この系を制御することの知られているguanosine 5'-3-0-(thio)triphosphate(GTPγS)は、相乗作用的に神経分泌顆粒形成を阻害した。しかし、PI-PLCがアクチン骨格系とTGNの相互作用を亢進するのに対し、GTPγSによる阻害の場合にはこの相互作用の亢進が見られなかった。これらの結果よりGTPγSによる阻害的な制御点はPIの関与する制御点と同じ一連の過程上にあるが、明らかに異なった点であることが示された。第二に、分泌小胞形成における被覆誘導や脂質誘導の実態を明らかにするため、脂質因子群や、クラスリン被覆を誘導する活性を持つマンノース6リン酸受容体に注目した。この受容体の細胞内分布に異常のある培養細胞株を得るため、我々が単離しつつあるTGN-エンドソーム-リソゾーム系に異常を持つ可能性のある変異細胞群を検索した。その結果、2クラスの変異細胞株を得ることができた。これらの細胞株は、TGNからの小胞形成を解析うるために有用なツールとなることが期待できる。

Before I 々 は, mammals の ホ ス フ ァ チ ジ ル イ ノ シ ト ー ル (PI) transfer protein (TP) PI が, ト ラ ン ス ゴ ル ジ ネ ッ ト ワ ー ク (TGN) か ら の god 経 secretory granules formed を promote す る cytoplasmic factors で あ る こ と を see い だ し, さ ら に, TGN か ら の god 経 secretory granules formed に お け る PI - TP と altogether With し て 働 く lipid membrane factor と し て の PI の essential な masato and と, cytoplasmic side factor と し て の ア ク チ ン is の potential な masato and を in stopping し た. Our first に は, こ の function of PI is の 発 dynamic に お け る for の カ ス ケ ー ド に role す る possibility の あ る cytoplasmic side factor と し て, god 経 secretory granules formed を suppression す る こ と が know ら れ て い る three quantity size G タ ン パ ク qualitative の masato and を に before establishing し た PC12 cells に origin す る cell free ア ッ セ を イ department with い て beg し 検 Youdaoplaceholder0. Bacterial origin の monoPI specific ホ ス ホ リ パ ー ゼ C (PI) - PLC と, 3 G quantity size タ ン パ ク qualitative に role す る こ と で こ の is を suppression す る こ と の know ら れ て い る guanosine 5'-3-0-(thio)triphosphate(GTPγS) 乗, the に neurosecretory particles that interact with 乗 form を hindrances to <s:1> た. し か し, PI - PLC が ア ク チ ン bone is と TGN の interaction を hyperthyroidism す る の に し, GTP gamma made S seaborne に よ る resistance against の occasions に は こ の interaction の hyperthyroidism が see ら れ な か っ た. こ れ ら の results よ り GTP gamma made S に よ る resistance against な suppression point は PI の masato and す る と suppression point with じ の process in a row on に あ る が, Ming ら か に different な っ た point で あ る こ と が shown さ れ た. Second に, small cell secreted form に お け る coating induced や lipid induced の state be を Ming ら か に す る た め, lipid factors group や, ク ラ ス リ ン coating を induced す る active を hold つ マ ン ノ ー ス 6 リ ン acid by let body に attention し た. こ の is let body の intracellular distribution に abnormal の あ る culture cell lines を have る た め, I 々 が 単 from し つ つ あ る TGN - エ ン ド ソ ー ム - リ ソ ゾ ー ム possibility of abnormal に を hold つ の あ る - different cells を 検 cable し た. The そ そ result, and the 2 ラス ラス <e:1> mutant cell lines を obtained る た とがで た た た た. こ れ ら の cell lines は, TGN か ら の vesicular form analytical う を る た め に useful な ツ ー ル と な る こ と が expect で き る.

项目成果

Ohashi,M.et al.: "An arrested late endosome-lysosome intermediate aggregate observed in a Chinese hamster ovary cell mutant isolated by novel three-step screening" Journal of Cell Science. (in press). (1999)

Ohashi,M.等人：“在通过新颖的三步筛选分离的中国仓鼠卵巢细胞突变体中观察到的晚期内体-溶酶体中间聚集体”《细胞科学杂志》。