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glial growth factorおよび関連する新しい蛋白の機能に関する研究

胶质生长因子及相关新蛋白的功能研究

基本信息

批准号：
09780730
负责人：
篠田純
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

ラット脊髄後根神経節(DRG)に発現してシュワン細胞に作用するglial growth factor(GGF)のmRNAをRT-PCR法、ハイブリダイゼーション法等によって解析した結果、単一遺伝子の選択的スプライシングにより生成される16種類のアイソフォームを同定した。主なスプライシング部位は、N末端・糖鎖結合部位・傍膜貫通・細胞内の各ドメインに認められたが、既知のNDFβ1,β3およびGGFIIに相当するもの以外の13種類は、全て新しいアイソフォームであった。このように、末梢神経系において、多種類のGGFのアイソフォームが作用していることが明らかになった。また、リボプローブマッピング法により出生後のラットDRGにおけるGGFmRNAの発現を解析した結果、膜貫通型、特にβ1アイソフォームが最も優位に発現することが明らかとなり、パラクリンとともにジャクスタクリンシグナリングの関与が示唆された。GGFmRNAの発現は出生後約1週間のミエリン形成前の時期にはほぼ一定しており、この時期にGGFが安定した発現を示すことにより、幼若シュワン細胞に対して生存因子として作用していることを示唆した。この発現はミエリン形成期以降徐々に低下したが、特にN-末端にエクソン2を有するアイソフォームの発現は成体DRGにおいて消失しており、このアイソフォームがミエリン形成前の末梢神経系に一過性に強く発現して、シュワン細胞の増殖に作用する可能性が示唆された。また、3'RACE法およびcDNAライブラリのスクリーニングの結果、レセプター結合部位であるEGF様ドメインを有さない特殊なGGFアイソフォームのcDNAクローンを2種類得た。現在このアイソフォームのin vivoでの発現をin situ hybridization法やリボプローブマッピング法により解析しており、また、発現ベクターの作成に従事している。

The results are analyzed by glial growth factor (GGF), mRNA RT-PCR, mRNA RT-PCR, and so on. The results are analyzed in the following steps: the results of the analysis, and the results selected by the computer. The results are the same as those selected by the computer. The main enzyme site and the N-terminal glycoprotein binding site are connected to the intracellular enzyme of each enzyme, the known NDF β 1, β 3 GGFII is equivalent to the other 13 types, and all the new ones have the same concentration. The information system, the terminal god system, and the multi-class GGF information system play an important role in the development of the system. After birth, the results of DRG and GGFmRNA were analyzed. The results of the analysis, the type of the membrane, the most sensitive position of the disease, the signs of the disease, the symptoms of the disease, the symptoms of the disease and the signs of the disease were detected. About 1 month after birth, GGFmRNA was born in the first half of the year before the formation of the pregnancy. The GGF diazepam test showed that there was a significant increase in pregnancy, and that the survival factor had a significant effect on the survival factor of the baby. In the formative period of the disease, it is necessary to reduce the severity of the disease, and the results show that the adult DRG disappears during the formative period, and that the possibility of cellular colonization is demonstrated. There are two kinds of special GGF testing methods, such as the results of cDNA testing, the results of cDNA testing, and the results of cDNA testing in the combined part of the traine. there are two kinds of special results. Now that the in situ hybridization method has been established, the in vivo has been analyzed, and everything has been done.