ヒト造血系維持モデルとしてのヒトSCF遺伝子導入-SCIDマウスの検討

人类 SCF 基因转移作为人类造血系统维持模型 - SCID 小鼠的检查

• 批准号: 09780782
• 负责人: 福地 由美
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Central Institute for Experimental Animals
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780782/
• 关键词: ヒトSCF; 遺伝子導入-SCIDマウス; ヒト造血維持モデル

1. ヒトSCF遺伝子導入-SCID(hSCF Tg-SCID)マウスのヒト造血系細胞の維持能力の解析および白血病モデルとしての可能性を調べるため、ヒト白血病細胞株の移入実験を実施した。(1 )3GyのX線前処理後のhSCF Tg-SCIDマウスにヒト白血病細胞株の皮下および腹腔内投与による移入実験を試みた。ヒト白血病細胞株としては、UF-1,TF-1,MO7eの3株を用いた。解析は組織染色、フローサイトメトリー、RT-PCR等で行った。(2) TF-1,MO7eの2株については、60日間の観察期間終了後まで白血病細胞の生着は確認できなかった。これは、両細胞株ともにhuman GM-CSFに対する依存株であったため、human SCF単独では維持できなかったことが考えられる。(3) UF-1の移入実験では、数例で細胞の生着が確認できた。しかしながら、littermateのC57BL/6J-SCID(B6J-SCID)マウスへの同細胞の生着性・増殖性との間に有意差はなかった。現在、他のヒト造血系細胞の移入を試みている。また、移入経路についての検討も行っている。2. ヒト多造血因子同時発現マウスの作製の前実験として、3GyのX線前処理後のhSCF Tg-SCIDマウスに対して、まずヒトGM-CSFおよびヒトIL-3を発現するトランスフェクタントを皮下移入し、その5日後にヒト凍結骨髄細胞の移入実験を試みた。しかしながら、30日間の観察期間終了後までヒト由来の細胞は検出できなかった。現在、NOD/SCID化も含め、さらなる検討を試みている。

1. Analysis of the maintenance ability of hematopoietic cells induced by SCF gene transfer into SCID(hSCF Tg-SCID) and the possibility of leukemia cell transfer were investigated. (1 ) hSCF Tg-SCID cells after 3 Gy X-ray pretreatment were injected subcutaneously and intraperitoneally into leukemia cells. Three leukemia cell lines, UF-1,TF-1, MO7e, were used. Analysis of tissue staining, RT-PCR, etc. (2)TF-1,MO7e 2 strains Human GM-CSF is the only cell line that can be maintained. (3)UF-1 migration was confirmed in several cases. C57BL/6J-SCID (B6J-SCID) is a kind of mittermate. Now, he's trying to transplant hematopoietic cells. In addition to the above, it is also necessary to carry out the investigation and discussion in the process of moving into the road. 2. The results showed that hSCF Tg-SCID cells could be induced by GM-CSF and IL-3 simultaneously before and after 3 Gy of X-ray pretreatment, and the frozen bone marrow cells could be transplanted subcutaneously after 5 days. After the 30-day observation period, the cells from which they originated were released. Now, NOD/SCID is included in the list.