ヒト造血系細胞維持モデルのためのヒトSCF遺伝子導入マウスの作製

用于人类造血细胞维持模型的人类SCF转基因小鼠的产生

• 批准号: 08780809
• 负责人: 福地 由美
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kanagawa Academy of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780809/
• 关键词: ヒトSCF; 遺伝子導入マウス; ヒト造血系細胞維持モデル

ヒトSCF遺伝子導入(hSCF Tg)-SCDマウスの作製1.新たに構築したpCDSRα-hSCF発現ベクターより全長7.4KbのSRα-hSCF導入用遺伝子を切り出し、この遺伝子をB6マウス受精卵に注入して、hSCF Tgマウス8匹を得た。2.得られたhSCF Tgマウスの血清を用いてELISAによる可溶型hSCFの定量を行い、可溶型hSCFを発現するTgマウス3匹を得、これをfounderとした。3.この3系統のうち、子孫への導入遺伝子の伝達が最も安定し、かつ発現する可溶型hSCF濃度が他の系統よりも高かった1系統を選びSCD化を行った結果、F3マウスでは得られたTgマウス全てがTg-SCDマウスであり、血清中には100〜150pg/mlの可溶型hSCFを発現していた。4.得られたhSCF Tg-SCDマウスの各臓器におけるhSCFの発現をhSCFに特異的なプライマーを用いたRT-PCRによって解析した結果、肺、脾臓、肝臓、骨髄等、多臓器で認められた。また、血液組成および各組織はいずれも正常であった。5.現在、このhSCF-Tg-SCDマウスのタンパクレベルでのhSCF(特に膜結合型hSCF)の発現をWestem blotおよびフローサイトメトリー等で調べており、さらに、ヒト培養肥満細胞の移入実験を行っている。6.今後は、ヒト造血系細胞の移入実験を含め、hSCF Tg-SCDマウスのさらなる解析を進めるとともに、他のサイトカインおよびサイトカインレセプターTg-SCDマウスとの複合化を行い、よりヒト造血系細胞の維持に優れた実験動物モデルとしての可能性を探っていく計画である。

1. A new construction of pCDSRα-hSCF was constructed, which was 7.4Kb in length. The hSCF Tg was 8 times higher than that of pCDSRα-hSCF. 2. hSCF Tg was detected by ELISA and the soluble hSCF was detected by ELISA. 3. The concentration of soluble hSCF in the three systems was the most stable and the soluble hSCF concentration in the three systems was the highest in the three systems. The SCD results showed that the soluble hSCF concentration in the serum was 100 ~ 150pg/ml. 4. hSCF Tg-SCD analysis results, lung, spleen, liver, bone, etc., and multi-organ recognition The blood composition is normal. 5. Now, the development of hSCF(membrane-bound hSCF) in hSCF-Tg-SCD can be regulated by Western blot and other methods. 6. In the future, we will explore the possibility of the transplantation of hematopoietic cells into animals, including the analysis of hSCF Tg-SCD, the recombination of hematopoietic cells and the maintenance of hematopoietic cells.