難吸収生理活性物質の腸管吸収速度を制御するための培養細胞を用いたモデリング

使用培养细胞进行建模来控制吸收不良的生理活性物质的肠道吸收率

• 批准号: 10750575
• 负责人: 木村 幸敬
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10750575/
• 关键词: 中鎖脂肪酸; モデリング; 吸収速度制御; 培養細胞; Caco-2; 難吸収性物質

本年度は以下の項目について研究を実施した。1)吸収促進能の発現と中鎖脂肪酸の蓄積・透過過程の解析プラスティックウェル上に生育させたCaco-2細胞層への侵入蓄積過程をラジオアイソトープラベルしたオクタン酸(C8)、デカン酸(C10)、ドデカン酸(C12)を用いて実験し、解析した。細胞層への浸入係数は、pH7.3でそれぞれ3.4×10^<-5>(C8)、3.4×10^<-5>(C10)、1.6×10^<-4>(C12)(cm/s)であり、疎水度の高いC12が最も速く浸入した。溶液のpHを変化させてもこれらの係数はほとんど変化しなかった。また、細胞層への分配係数も4.4×10^2(C8)、5.9×10^2(C10)、2.9×10^3(C12)という値が得られ、中鎖脂肪酸が示す吸収促進能発現機構のシミュレートモデルの基礎因子を解明した。2)腸溶性カプセルの作製と試験親水性難吸収性物質の吸収促進に必要な濃度という因子や良好なカプセル化という因子などを考察し、中鎖脂肪酸を封入した腸溶性ゼラチンカプセルを調製した。3)実用化の安全性試験奇数鎖の脂肪酸を含むC8〜C12をCaco-2細胞層に一定時間さらした後に、細胞ミトコンドリアデヒドロゲナーゼ活性をMTT法で、細胞骨格への影響をアクチンフィラメント染色で測定した。親水性物質透過の促進効果が同程度であるとき、MTT活性を最も下げたのがC10であり、C12はMTT活性を保持させることが明らかになった。C10のみがアクチンフィラメントを大きく変化させることが明らかになった。これらの手法の、細胞安全性試験の第1次スクリーニングとしての可能性を示した。

The following projects will be studied and implemented this year. The main results are as follows: 1) absorption promotes the detection of fatty acid accumulation in fatty acids through the process of analysis. Caco-2 cells invade the process of accumulation of trace fatty acids (C8, C10, C12). The number of cells immersed, pH7.3 and lt;-5> (C8), 3.4x10 ^ & lt;-5> (C10), 1.6x10 ^ & lt;-4> (C12) (cm/s), water content, C12, the fastest immersion temperature. The solution was treated with pH. The number of the solution was different. There are 4.4 × 10 ^ 2 (C8), 5.9 × 10 ^ 2 (C10), 2.9 × 10 ^ 3 (C12) and 2.9 × 10 ^ 3 (C12), respectively. The absorption of fatty acids is shown to promote the absorption of fatty acids. 2) the solubility of water-soluble substances, the absorption of water-borne substances, the promotion of absorption, the necessary factors, the factors of good solubility, the absorption of water-soluble substances, the absorption of water-soluble substances, the promotion of absorption, the promotion of necessary factors, and the investigation of fatty acids, medium fatty acids and fatty acids. 3) Odd fatty acids in C8 ~ C12 Caco-2 cells were used for safety. After a certain period of time, the activity of Caco-2 cells was measured by MTT method, and the activity of Caco-2 cells was determined by cell culture assay. Water-borne compounds promote the same level of MTT activity, C10 and C12 MTT activity to the same extent. C10