コレシストキニン・A型受容体欠損マウスの作製とその生理・生物学的解析

缩胆囊素A型受体缺陷小鼠的产生及其生理生物学分析

基本信息

批准号：
10770056
负责人：
瀧口総一
金额：
$ 1.09万
依托单位：
National Research Institute for Child Health and Development
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

ペプチドホルモンであるコレシストキニン(CCK)のA型受容体は、膵臓の増殖、外分泌促進、胆嚢の収縮など末梢での機能、また摂食や痛覚などの中枢における機能について解析されている。本レセプターの個体レベルでの機能を調べる目的で、ノックアウトマウスの作成を行った。ターゲッティング・ベクターの構築は、受容体の機能を全くなくすことを考えエクソン1および2をネオマイシン耐性カッセトで置換するように計画した。F1ヘテロ変異マウス同士の交配により作成したF2マウスをDNAレベルおよびRNAレベルで確認をしたところ、約4分の1がホモ変異マウスであり、本レセプターは生存には必須ではないことが判明した。さらに同受容体欠損マウスは、生殖機能の異常、中枢神経系を含めた各組織の明らかな形態異常を認めなかった。また、同受容体変異ラット(OLETFラット)とのアナロジーより予想された肥満、耐糖能の異常なども認められなかった。現時点での野生型との差は、CCKを皮下注により投与したときに野生型マウスではアミラーゼ分泌促進が観察されるのに対して、同受容体欠損マウスでは全く分泌促進が起こらないこと、および同様にCCKを投与したときに野生型マウスでは胆嚢の収縮が起こるのに対して、同受容体欠損マウスでは全く収縮が起こらないことの2点である。以上により同受容体がCCK刺激時における膵臓における外分泌および胆嚢収縮において重要な役割を果たしていることが明らかになった。今後同受容体欠損と疾病との関連について、中枢神経系での機能も考慮に入れて解析する予定である。

已经分析了其外周功能（例如胰腺生长，外分泌促进和胆囊收缩）的肽激素胆囊动蛋白（CCK）的A型受体（CCK），以及其中心功能，例如喂食和疼痛感觉。创建敲除小鼠以研究该受体在单个水平上的功能。鉴于受体功能的消融，靶向载体的构建旨在用耐新霉素的刀片代替外显子1和2。当F2小鼠通过在DNA和RNA水平的F1异源小鼠之间交配确认F2小鼠时，发现大约四分之一的小鼠是同质小鼠，并且该受体对于生存并不是必需的。此外，缺乏受体的小鼠在包括中枢神经系统在内的每个组织中没有生殖功能异常或明显的形态异常。此外，没有观察到肥胖或葡萄糖耐受性的异常，如类比与相同受体突变大鼠（OLETF大鼠）的类比所预测。当前与野生型小鼠的当前差异是，当皮下施用CCK时，在野生型小鼠中观察到淀粉酶的分泌，而当皮下施用CCK时，在小鼠中不会出现分泌促进，并且在CCK完全不会发生cck时，gallbladder contractions conterraction consection cck incection cck完全不存在。根本没有发生的小鼠。这表明该受体在CCK刺激期间在胰腺中的外分泌和胆囊收缩中起重要作用。将来，我们将考虑中枢神经系统的功能分析受体缺乏症和疾病之间的关系。