权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

黄色ブドウ球菌ペプチドグリカン架橋形式の分子機序

金黄色葡萄球菌肽聚糖交联形式的分子机制

基本信息

批准号：
10770120
负责人：
藤原環
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770120/
关键词：
Staphylococcus aureus epr lysostaphin endopeptidase resistance D-Ala-Gly endopeptidase

项目摘要

私どもは黄色ブドウ球菌染色体DNAよりStaphylococcus capitis EPK1株が有するepr遺伝子に類似した遺伝子をクローニングしeprhと名付けた。eprhは蛋白質レベルでepr,lifとそれぞれ58、56%の相同性を有していた。また黄色ブドウ菌球や表皮ブドウ球菌のfemと約30%の相同性を有していた。eprは発現するとS.capitis,S.aureusにおいて菌体ペプチドグリカンがglycylglycine endopeptidase Lysostaphinに抵抗性となる。このことからepr(endopeptidase resistance gene)と名付けられている。eprhはeprのホモログーと考えられたため、eprhを温度感受性プラスミドによって挿入変異した株を作成した。しかしながら、この株はLysostaphinにたいする感受性に変化を示さなかった。またeprhを過剰発現させた株においてもLysostaphin感受性は変化しなかった。ノーザン解析の結果、eprhは通常の状態では発現していないと考えられた。そこでeprのプロモーターの下流にeprhを接続し、黄色ブドウ球菌内で発現を試みたがやはりLysostaphinにたいする感受性に変化は認められなかった。以上の結果からeprhは通常、黄色ブドウ球菌では機能していない遺伝子である可能性が強く示唆された。eprhはアミノ酸の転移に関わる蛋白であると考えられるが、その機能については明らかではない。またeprhの27bp上流にeprhと同じ向きにorfが存在し、他の溶菌酵素と相同な領域を有する蛋白質がコードされていた。このORFをLytNと名付けた。Hisx6 tagの後ろにLytNを融合させて発現した蛋白質はS.aureus菌体を溶解したが、M.luteusは溶解しなかった。以上のことから、LytNは新規の溶菌酵素であることが明らかにされた。近年、Navarreらは黄色ブドウ球菌バクテリオファージphi11の有するmurein hydrolaseとしてD-Ala-Gly endopeptidaseを見いだした。その後の検索から私どもがクローニングしたLytNはこのD-Ala-Gly endopeptidaseと高い相同性を有することが明らかにされた。LytNがD-Ala-Gly endopeptidaseであることが示唆されている。今後、LytNの酵素活性について明らかにする必要がある。

Private