インテグラーゼ活性を利用した非ウイルス性遺伝子組換えベクターの開発
利用整合酶活性开发非病毒重组载体
基本信息
- 批准号:12771457
- 负责人:
- 金额:$ 1.22万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 2001
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
代表研究者の中島は、ある種の遺伝子では、レトロウイルスベクター導入細胞のクローンの10%以上が、元の遺伝子配列とは異なっていることを見出し、発表を行ってきた。そこで新たに、変異を受けにくいレトロウイルスベクターの改変を試みている。すなわち、レトロウイルスが染色体に組み込まれるために必要なインテグラーゼ(INT)と、プロウイルス前駆体を用いて、標的細胞の染色体に効率よく遺伝子を組み込む方法の開発を目的としている。INTはウイルス遺伝子pol領域にコードされる酵素である。RNAゲノムは逆転写酵素によりdsDNA(プロウイルス前駆体)となった後、INT活性によりプロセッシングと、染色体へのジョイニングがおこりプロウイルスとなる。従って予め組み込みたい遺伝子をプロウイルス前駆体として調整して、INTを同時に細胞内に導入した場合、ウイルスの感染に依存することなく目的遺伝子を宿主染色体に組み込むことができると考えられる。以上のことより、RTに依存せずINTにより染色体に積極的に組み込まれる遺伝子導入系の開発を行っている。PCRによりプロウイルスゲノムDNAを作製した。大腸菌発現系を使いHisタグINTを調整し、組み込み効率を検討している。
More than 10% of the cells introduced into Nakajima's cells were found to be genetically modified. The new, different, different. The aim of the method is to develop a chromosome encoding method for target cells, which is based on the chromosome encoding method (INT) and the chromosome encoding method for target cells. INT is the domain of the gene pol. RNA is the reverse transcription enzyme, dsDNA(precursor), INT activity, chromosome, and so on. In addition, the host chromosome is also selected from the group consisting of a host chromosome, a host chromosome and a host chromosome. The development of gene introgression system is carried out in the positive chromosome group and the negative chromosome group. PCR is the first step in the DNA sequencing process. E. coli development system in the middle of His INT adjustment, group center rate in the middle of discussion
项目成果
期刊论文数量(8)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
中島英逸: "臨床遺伝子医学ガイダンス -分子医学へのアプローチ-"南山堂. 8 (2000)
Hideitsu Nakajima:“临床遗传医学指南 - 分子医学方法 -” Nanzando 8 (2000)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Eiitsu Nakajima: "Mutation Rate and Spectrum of HIV and MLV Vectors"Molecular Therapy. Vol 1,No 5. 309-309 (2000)
Eiitsu Nakajima:“HIV 和 MLV 载体的突变率和谱”分子治疗。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Eiitsu NAKAJIMA: "Mutation Rate and Spectrum of HIV and MLV Vectors"Molecular Therapy. Vol1,No5. 309-309 (2000)
Eiitsu NAKAJIMA:“HIV 和 MLV 载体的突变率和谱”分子治疗。
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中島 英逸其他文献
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