微小管重合中心(MTOC)の機能に関わる分子シャペロンの研究

参与微管聚合中心（MTOC）功能的分子伴侣研究

• 批准号: 12780530
• 负责人: 竹田 哲也
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780530/
• 关键词: テトラヒメナ; 14nm繊維タンパク質; hsp60; 基底小体; 口部装置形成; 繊毛; 微小管; 表層パターン形成

申請者は、繊毛虫Tetrahymenaの細胞骨格タンパク質の1つである14nm繊維タンパク質(14FP)にATP依存的に結合する因子として、Tetrahymena hsp60(以下Thsp60)を同定した。Thsp60は、その分子量が65kDa、等電点は6.2であり、抗ヒトhsp60モノクローナル抗体(LK-2)によって特異的に認識された。LK-2を用いた蛍光抗体法および免疫電子顕微鏡法によって、Thsp60はミトコンドリアに局在することがわかった。驚くべきことに、Thsp60はミトコンドリアだけでなく繊毛の基底小体や口部装置(基底小体から構成されるオルガネラ)にも局在することが明らかになった。Thsp60は、細胞をNP-40処理した細胞骨格モデルにおいてもの基底小体に局在したことから、Thsp60が基底小体において細胞骨格成分の1つとして存在する可能性が示唆された。さらにThsp60の口部装置への局在は、細胞分裂時あるいは有性生殖時の形成過程にある口部装置において特に顕著であった。これらの結果は、Thsp60がミトコンドリアにおいてタンパク質のフォールディングに関わると同時に、基底小体のようなミトコンドリア以外の細胞内にも局在し、口部装置のような表層構造のパターン形成に関わる可能性を示唆している。現在、Thsp60遺伝子のクローニングを行っており、同定された遺伝子をもとにThsp60のノックアウト株を作成し、その表現形の解析から基底小体におけるThsp60の機能を明らかにしたいと考えている。

The applicant determined the ATP-dependent binding factor of Tetrahymena hsp60(Thsp60 below) at the same time as the cytoskeleton of Tetrahymena (14 nm). Thsp60 has a molecular weight of 65kDa and an isoelectric point of 6.2 kDa. Anti-Thsp60 antibody (LK-2) is recognized specifically. LK-2 was detected by light antibody and immunoelectron microscopy. Thsp60 is a very important part of the structure of the basal body and the mouth of the hair. Thsp60 and NP-40 treatment of the cellular skeleton in the basal body, Thsp60 and basal body in the cellular skeleton component of the existence of a possibility Thsp60 oral device is in the process of cell division and sexual reproduction. These results indicate that Thsp60 is related to the formation of intracellular structures other than basal bodies and the formation of oral surface structures. Now, Thsp60 gene expression is in the process of transformation, and the same gene expression is in the process of transformation. Thsp60 gene expression is in the process of transformation. Thsp60 gene expression is in the process of transformation.

项目成果

Tetsuya Takeda,Isao Yoshihama,Osamu Numata: "Identification of Tetrahymena Hsp60 as a 14-nm Filament Protein/Citrate Synthase-Binding Protein and Its Possible Involvement in the Oral Apparatus Formation"Genes to Cells. 6巻・2号. 139-150 (2001)

Tetsuya Takeda、Isao Yoshihama、Osamu Numata：“四膜虫 Hsp60 作为 14 nm 丝蛋白/柠檬酸合酶结合蛋白的鉴定及其在口腔器具形成中的可能参与”基因到细胞，第 6 卷，第 2 期。139-150 (2001)