試験管内インフラマソーム再構成システムを利用した創薬と診断プローブの開発

使用体外炎性体重建系统进行药物发现和诊断探针开发

• 批准号: 17H00599
• 负责人: 金子 直恵
• 金额: $ 0.36万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17H00599/
• 关键词: インフラマソーム; コムギ胚芽無細胞タンパク質合成技術; 炎症

インフラマソームとは、病原微生物や代謝産物などの分子パターンを認識して活性化する細胞質内タンパク質複合体の総称であり、炎症性サイトカインであるIL-1βやIL-18の産生を誘導することで、炎症反応を惹起する。インフラマソームは、リガンドを認識するNod-like receptors(NLR)s、IL-1β前駆体を切断して活性化する酵素であるカスパーゼ1、それらのアダプター分子として働くASCにより構成されている。多くのNLRsが、遺伝性炎症疾患やメタボリックシンドロームと関連していると報告されている。昨年度までに、インフラマソーム構成タンパク質を、コムギ胚芽無細胞合成技術を用いて合成し、Alpha(Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay)で検出することにより、NOD1, NOD2ノドソーム、AIM2, NLRP3, NLRC4インフラマソームの試験管内再構築に成功している。これらの系のうち、本年度は、とくにNLRP3インフラマソームについて、直接阻害する分子の探索により、炎症疾患の分子標的薬の開発を目指すと同時に、インフラマソームを活性化する分子の探索を行なった。まず、東京大学創薬機構から提供を受けたコアライブラリを対象に、一次スクリーニングを行った。有力な化合物についてはタイトレーションを実施後、阻害する化合物と活性化がみられる化合物を見出した。次に、これらの化合物を対象に、二次スクリーニングにとりかかった。具体的には、HEK293T細胞にインラマソーム構成分子を発現するプラスミドを強制発現させる方法での効果の確認及びヒト末梢血での効果を確認した。いずれも同時に細胞毒性を評価した。これらの結果を基に特許申請を行なった。今後は有力な候補化合物を、炎症可視化マウス(IDOL)と疾患モデルマウスを用いて、個体レベルでの有用性を評価する。

インフラマソームとは, pathogenic microorganism や metabolite などのmolecule パターンを recognition してactivation するcytoplasmic タンパク plasmid complexの総名であり, inflammatory サイトカインであるIL-1β, IL-18 のinduced することで, inflammatory reaction をinduced する. Nod-like Receptors (NLR)s, IL-1β precursor cleavage and activation enzymesるカスパーゼ1, それらのアダプターmolecule として働くASC により constitutes されている. There are many NLRs, and there is a report on the relationship between chronic inflammatory disease and chronic inflammatory disease. Last year's までに, インフラマソーム constituted タンパクquality を, コムギ germ cell-free synthesis technology をいて synthesis し, Alpha (Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay)で検出することにより、NOD1, NOD2ノドソーム、AIM2, NLRP3, NLRC4's in-tube reconstruction was successfully completed.これらの性のうち、This year、とくにNLRP3インラマソームについて、Directly hinder the exploration of するmolecules Molecular targets for inflammatory diseases include molecular targets for inflammatory diseases and molecular targets for inflammatory diseases.まず, Tokyo University Institute of Technology provides けたコアライブラリを対 resemble に, 一スクリーニングを行った. After the application of the potent についてはタイトレーションを実, the blocking する compound and the activated がみられる compound を见出した. Secondary, secondary スクリーニングにとりかかった. Specific components of HEK293T cells and HEK293T cells. Confirmation of the effect of ミドをforced 発appearanceさせるmethod and びヒトperipheral blood effect をconfirmationした.いずれもAt the same time, it is also cytotoxic. The result of これらの is the basis of the license application を行なった. From now on, we will review the effectiveness of candidate compounds, inflammation visualization tool (IDOL) and disease control, and the usefulness of individual tools.

项目成果

NLRP3インフラマソームを標的とする低分子化合物

靶向NLRP3炎症小体的小分子化合物

• 发表时间: 2017

無細胞AIM2インフラマソーム再構成系の創薬への応用(An application of AIM2 inflammasome in a cell-free system for drug discovery)

AIM2 炎症小体在药物发现的无细胞系统中的应用

• 发表时间: 2017
• 作者: Kaneko N;Ito Y;Yamamoto T;Morikawa S;Zhou Wei;Kurata M;Takeda H;Sawasaki T;Masumoto J.
• 通讯作者: Masumoto J.

Applications of reconstituted inflammasomes in a cell-free system to drug discovery and elucidation of the pathogenesis of autoinflammatory diseases.

• DOI: 10.1186/s41232-017-0040-y
• 发表时间: 2017
• 期刊: Inflammation and regeneration
• 影响因子: 8.1
• 作者: Kaneko N;Iwasaki T;Ito Y;Takeda H;Sawasaki T;Morikawa S;Nakano N;Kurata M;Masumoto J
• 通讯作者: Masumoto J