チエノピリジン系薬剤の血中濃度及びP2Y12結合量測定による薬効評価法の探索

噻吩并吡啶类药物血药浓度及P2Y12结合量测定药效评价方法的探索

• 批准号: 17H00616
• 负责人: 樋口 裕哉
• 金额: $ 0.36万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17H00616/
• 关键词: チエノピリジン系; ADP受容体P2Y12; 薬効評価

臨床現場で主に使用されるADP受容体P2Y12阻害薬の血小板凝集抑制作用は、さまざまな要因によって大きく変動することが知られている。一方で統一した凝集能評価法は構築されておらず、血小板凝集能の維持時間が短いため、臨床現場では採血後即座に凝集能の測定を行う必要がある。そのため、血小板凝集能の評価が行われないまま多くの患者に対して抗血小板療法が行われている。血小板凝集能を評価しながらより効果的かつ安全に抗血小板薬を使用するためには、血液サンプルの保存方法等による影響を受けない血小板凝集抑制作用の評価法を確立することが重要である。初めに、チエノピリジン系薬剤のP2Y12阻害薬の受容体への結合量が薬効を反映すると考え、質量分析計による分析を試みたが、困難であることが明らかとなった。抗血小板薬は血小板凝集カスケードの最下流に位置するIntegrinαⅡbβⅢの活性化を阻害することでその凝集抑制作用を発揮する。そこで、血小板凝集カスケードの下流に位置するTalin、IntegrinαⅡbβⅢを標的とし、それらのリン酸化レベルが血小板凝集能を反映すると考え、既存の凝集能評価法との関係を評価することとした。リン酸化レベルの測定のために、定量性に優れる質量分析装置を用いることとし、Talin、IntegrinαⅡbβⅢのアミノ酸配列のうち、特異性が確認でき、リン酸化ペプチドの報告のある標的リン酸化ペプチドを決定した。その後、それら標的リン酸化ペプチドの測定系を確立するために、多血小板血漿と乏血小板血漿を精密質量分析装置で測定し、多血小板血漿特異的なピークを多変量解析により求め、その中からTalinの標的ペプチドが測定可能であることを見出した。現在は、IntegrinαⅡbβⅢの測定系の確立を試みつつ、Talinのリン酸化レベルと光透過性により血小板凝集能を測定するaggregometerによる既存の凝集能評価法との関係を解析中である。

Platelet aggregation inhibition by ADP receptor P2Y12 is mainly used in clinical field, and the main causes of platelet aggregation inhibition are: A unified agglutination assay is necessary to establish a method for the determination of platelet aggregation activity immediately after blood collection in clinical settings. The evaluation of platelet aggregation activity is performed in many patients and antiplatelet therapy is performed in many patients. Platelet aggregation activity evaluation, safety, use of antiplatelet agents, preservation methods, etc., are affected by the establishment of an evaluation method for platelet aggregation inhibition. The initial and final analysis of the P2Y12 inhibitor and the amount of the receptor are reflected in the analysis of the quality analysis. Antiplatelet agents inhibit aggregation by inhibiting the activation of IntegrinαⅡbβⅢ at the downstream position of platelet aggregation. The relationship between platelet aggregation activity and platelet aggregation activity is evaluated by the following methods: Talin, IntegrinαⅡbβⅢ, and platelet aggregation activity. Determination and quantitative optimization of the quality analysis device, determination and specificity of the quality analysis device, determination and determination of the quality analysis device The determination system of platelet rich plasma and platelet poor plasma was established. The determination system of platelet rich plasma and platelet poor plasma was established. The determination system of platelet rich plasma was established. Now, the determination system of IntegrinαⅡbβⅢ has been established, and the relationship between the determination of platelet aggregation energy and the existing aggregation energy evaluation method has been analyzed.