放射線硬化樹脂の樹脂包埋組織標本作製への応用に関する研究

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【研究目的】課題番号:18924018にて行った研究でHEMA/Polypropylene Glycol 1000 Dimethacrylate(n=23)/水=14/6/80の混合液に最短3日の浸漬時間でホルマリン固定ブタ肝臓を樹脂包埋標本作製に成功した。同様の組成と思われる市販のキットでバイオプシー組織標本から組織切片を作製し良好な結果を得たとの報告があり、本研究において形態保存の良好な組織切片の作製が可能な処方を検討した。【研究方法】(1)polyethylene Glycol dimethacrylate(n=23,14,9,4,3,2,1),(2)HEMA(2-hydroxyethyl methacrylate),(3)HEA(2-hydroxyethyl acrylate)を用い、架橋剤(1)と(2)、(3)の様々な組み合わせと混合比を以下の方法により比較検討た。溶媒は水、エタノールまたはアセトンを用いた。組織は10%formaline/PBSにて1週間以上浸漬固定した食用のブタ肝臓を用いた。放射線の照射は日本原子力研究開発機構高崎研究所内の設備にて実施した。1cm角の立方体に裁断したブタ肝臓をモノマー溶液に浸漬し、-80℃で30Gyの放射線を照射し、完成した標本の形状、硬さ、組織所見を基準に最適なモノマーの混合比、放射線の照射量を決定した。最終的に浸漬固定したブタ肝臓を半切し、決定した条件で標本作製できることを確認した。作製した標本からは組織切片を作製し、HE染色、を試みた。【研究成果】最良の処方はHEMA/Polyethylene Glycol #400 Dimethacrylate(n=9)/アセトン=14/6/80だった。研究目的に記載した処方で見られた個々の細胞の収縮がほぼ無くなったが、コントラスト低い組織像しか得られず実用には至らなかった。