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系統的な正常ヒト胚子、初期胎児の顕微標本並びに全身肉眼立体的永久標本の作製

系统化生产正常人类胚胎、早期胎儿显微标本、永久性全身宏观三维标本

基本信息

批准号：
20929014
负责人：
佐藤文夫
金额：
$ 0.37万
依托单位：
Shimane University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20929014/
关键词：
ヒト胚子初期胎児プラスティネーション

项目摘要

研究目的:ヒト胚子(妊娠約3ヶ月、頂殿長:30mm迄)及び初期胎児の標本を用いて、学生実習および研究者への供覧を目的とした発生段階に沿った系統的な組織標本、肉眼立体永久標本を作製する。研究方法:ヒト胚子・初期胎児標本を用いた本研究の実施は、島根大学医学部・医の倫理委員会で承認されている。組織標本作製は、胚子は発生段階別の連続切片、初期胎児は主要臓器を学生実習供覧用を主とし作製した。脱水・パラフィン包埋後、薄切切片(矢状断・水平断組織標本、形態計測用連続切片)を作製し、基本的にヘマトキシリン・エオジン染色を施した。肉眼立体永久標本作製は、胚子及び初期胎児の全身標本と部分解剖標本を、従来の作製法を改変し作製した。ホルマリン固定標本は常温にて水洗、ブアン固定標本は炭酸リチウムでピクリン酸の脱色後水洗し、冷蔵庫内で前処理し、-25℃の冷凍庫内で、アセトン脱水・脱脂を経て、シリコンゴム液を入れたポリ袋に移し含浸させ、室温で真空ポンプ減圧操作を経て、室温下放置にて硬化させ、標本を作製した。研究成果:ヒト胚子・初期胎児組織標本を作製し、学生が成人の組織標本と比較し、発生の仕組み、構造と機能の形成・発現過程を理解することが容易になり、また研究用材料としても使用された。肉眼立体永久標本は、ヒト胚子・初期胎児という小さな標本作製に、従来の標本作製法に前処理を施し、脱水・脱脂方法、シリコンゴムの浸透時間や方法を種々検討改変し、固定液の脱色処理を行い、標本の収縮が比較的少なく、細部の観察が可能な標本を作る事に成功した。これらの標本は、ホルマリン固定標本と比べ、観察をする際の安全性が高まり、取り扱いも容易になった。非常に貴重なヒト胚子・初期胎児の標本を用いて、取り扱い易く半永久的に保存可能な標本の作製手技を確立し、系統的な標本を作製した事は、学生実習のみならず、発生学研究上も非常に有益であった。

Objective: To study the effects of embryonic development (about 3 months of gestation, apical length:30mm) and early fetal development on tissue and macroscopic tissue. Methods: The clinical practice of this study was approved by the Ethics Committee of Shimane University School of Medicine. The tissue preparation method includes the following steps: preparation of tissue slices, preparation of embryo development stages, and preparation of embryo development stages. After dehydration and embedding, thin sections (sagittal and horizontal sections, morphological sections) were prepared and basic staining was performed. The method of making the three-dimensional permanent embryo and the whole body of the early fetus is changed. After washing at room temperature, pre-treatment in cold storage, refrigeration at-25℃, dehydration, degreasing, mixing solution, bag transfer, immersion, vacuum pressure reduction at room temperature, hardening at room temperature, and processing. Research results: Embryo, early fetal tissue preparation, student and adult tissue preparation comparison, development and organization, structural and functional formation, development process, easy to understand, research materials and use In the preparation process of the macro-stereoscopic permanent plum, the pretreatment, dehydration, degreasing method, impregnation time and method of the preparation process of the fresh plum are discussed, the decolorization treatment of the fixing solution is carried out, the shrinkage of the plum is relatively small, and the detailed inspection is possible. The security of the system is high and easy to detect. It is very valuable to use the embryo, the early embryo, the semi-permanent preservation, the establishment of the production technology, the systematic production of the embryo, the study of the embryo, and the biological research.