ヒト胚子および初期胎児の顕微標本および肉眼立体的永久標本の作製

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研究目的:ヒト胚子(妊娠月齢約3ケ月、頂殿長:30mm迄)・初期胎児の標本を用いて、学生実習および研究者への供覧を目的とした発生段階に沿った系統的な組織標本、肉眼立体永久標本を作製することを目的とした。研究方法:ヒト胚子・初期胎児標本を用いた本研究の実施は、島根大学医学部・医の倫理委員会で承認されている。組織標本作製は、主に学生実習供覧用として、胚子は発生段階を追った連続切片標本を、初期胎児は主要臓器の組織標本を作製した。脱水・パラフィン包埋後、薄切切片(矢状断・水平断組織標本および形態計測用連続切片)を作製し、ヘマトキシリン・エオジン染色を基本とした。また、肉眼立体永久標本作製は、いくつかの発生段階の胚子及び初期胎児の全身標本を、従来の標本作製法を改変し作製した。ホルマリン固定の標本を、常温にて水洗後、冷蔵庫内で前処理し、-25℃の冷凍庫内で、アセトンでの脱水・脱脂を経て、シリコンゴム液を入れたポリ袋に移し含浸させた。その後、室温での真空ポンプ減圧操作を経て、室温下放置にて硬化させ、標本を作製した。研究成果:ヒト胚子・初期脂児の組織標本を作製し、学生が成人の組織標本と比較し、発生の仕組み、構造と機能の形成・発現過程を理解することが容易になり、また研究用材料としても使用された。肉眼立体永久標本に、ヒト胚子・初期胎児という小さな標本作製用に、従来の標本作製法に前処理を施し、脱水・脱脂方法、シリコンゴムの浸透時間や方法を種々検討改変し、標本の収縮が比較的少なく、細部の観察が可能な標本を作る事に成功した。これらの標本は、ホルマリン固定標本と比べ、観察をする際の安全性が高まり、取り扱いも容易になった。非常に貴重なヒト胚子・初期胎児の標本を用いて、取り扱い易く半永久的に保存可能な標本の作製手技を確立し、系統的な標本を作製した事は、学生実習のみならず、発生学研究上も非常に有益であった。