多重座位VNTR解析の院内感染対策への実用化に関する研究

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抗菌薬に対して抵抗性を示すMRSAは世界的にも検出頻度は高まっており.病院内にて耐性菌によるアウトブレイクを起こしている施設も少なくない。院内感染対策として、この様な耐性菌を型別判定し、感染源および感染経路を把握する事が重要な課題となっている。現在、パルスフィールドゲル電気泳動法(PFGE)を用いた遺伝子タイピングが汎用されているが、この方法は特別な装置が必要でコストも高く、また解析に時間を要するなどの問題がある。今回、PFGEよりも迅速かつ操作が簡便な遺伝子解析が可能な方法であるvariable-number of tandem-repeats(VNTR)を利用したmultiple-locus VNTR(MLVA)による遺伝子タイピングの有用性を検討し、院内感染対策としての実用化を目的として研究を行った。VNTR分析は反復配列のコピー数の違いを捉えるため、菌株によって変異の多い領域を解析する必要があり、今回は8つの領域を設定して臨床から分離されたMRSAを対象にMLVA解析を実施した。また、同時に遺伝子タイピングのゴールドスタンダードであるPFGE解析も実施し、MLVA解析の結果と比較検討を行った。臨床分離株10株を対象に行ったが、今回の測定条件においては結果の再現性について特に問題は認められなかった。MLVA解析では10株のうち7パターン、PFGE解析では8パターンに型別された。PFGE解析で同一由来と考えられた株はMLVA解析でも同一のパターンを示した。MLVA解析のみに同一パターンを示した株をPFGE解析と比較すると、系統樹として70%程度の相同性であった。今回の条件で実施したMLVA解析ではPFGE解析に比べて識別能がまだ劣っており、今後は変異の多い領域を特定して解析領域を増やすことにより、新しい遺伝子タイピングの技術として利用できるものと考えられた。