权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ヒトiPS細胞からの無フィーダー培養での肝細胞分化

人 iPS 细胞在无饲养层培养中分化为肝细胞

基本信息

批准号：
21931035
负责人：
松山さと子
金额：
$ 0.38万
依托单位：
Research Institute, International Medical Center of Japan
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21931035/
关键词：
ヒトiPS細胞肝細胞機能

项目摘要

ヒトiPS細胞は、京都大学由来株(253G1)、国立成育医療センター由来株(#40)を用いて検討した。分化誘導のプロトコールは、内胚葉分化、肝細胞初期分化、肝細胞成熟の3段階からなる分化誘導法で、一貫して単層平面培養で、無血清・無フィーダー法である。すなわち、動物由来成分の排除が達成され形態観察などが容易な優れた分化誘導系である。分化の過程で、様々の肝細胞マーカー(αフェトプロテイン、アルブミン、α-1アンチトリプシン(AAT)、チロシンアミノトランスフェラーゼ(TAT)、トリプトファン2,3ジオキシゲナーゼ(TDO2)、シトクロムP450(Cyp3A4))が培養期間依存的に遺伝子発現していることが確認できた。次に、分化の過程を蛋白レベルで検討した。その結果、αフェトプロテイン、アルブミン、肝酵素(AAT)はヒト肝(癌)細胞株(HepaRG、HepG2、HC)と同等に誘導された。遺伝子発現レベル、蛋白レベルでの肝細胞分化が確認されたので、最後に、成熟肝細胞機能の検討を行った。ICG取込能、グリコーゲン産生能、シトクロムC代謝活性のいずれの機能も分化細胞において十分に認められた。これらの3種類の成熟肝機能においても、ヒトiPS由来肝細胞はヒト肝(癌)細胞株(HepaRG、HepG2、HC)と同等、もしくはそれ以上であった。本報告での実績に基づいて、ヒトES細胞から肝細胞を分化誘導する研究計画を機関内倫理委員会にはかり、文部科学省に届け出て、ヒトES細胞を使用する研究も次年度に開始する予定である。

iPS cells, Kyoto University-derived strain (253G1), National Institute of Reproductive Medicine (#40) were used in the study. Differentiation induction method, endodermal differentiation method, hepatocyte initial differentiation method, hepatocyte maturation method, single layer culture method, serum-free methodすなわち、动物由来成分の排除が达成され形态観察などが容易な优れた分化诱导系である。The differentiation process and the characteristics of hepatocyte culture (α α τ τThe process of differentiation and differentiation is discussed in detail. The results showed that the liver enzymes (AAT), α-amyloid, HepG2 and HC could be induced equally in liver cancer cell lines. Gene development, protein development, and hepatocyte differentiation are identified, and finally, the function of mature hepatocytes is investigated. ICG can be used to produce, metabolize and differentiate cells. These three kinds of mature liver function cells are derived from liver cells and liver cancer cell lines (HepaRG, HepG2, HC). The results of this report are based on the evaluation of ES cells and induction of hepatocyte differentiation. The research plan is approved by the internal ethics committee of the Ministry of Education, Culture, Sports, Science and Technology. The start of the research year for the use of ES cells is scheduled.