オルガノイドを用いた脂肪由来幹細胞からの超高機能肝細胞様細胞の確立

使用类器官从脂肪干细胞建立高功能肝细胞样细胞

• 批准号: 22H03136
• 负责人: 島田 光生
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03136/
• 关键词: オルガノイド; 脂肪由来幹細胞; 超高機能肝細胞様細胞; 肝細胞様細胞; HLC

肝細胞様細胞（HLC）は多能性幹細胞から分化誘導が可能であるが、すべての肝細胞機能を肝細胞と同等に保持するようなHLCはいまだに作製できていない。これまでとは異なる新たなアプローチによって、より肝細胞に近い、超高機能肝細胞様細胞 (Super HLC)の作成方法が必要である。また、Super HLCの他家移植を考慮した際に、その免疫原性の評価も重要となる。本研究では以下の検討内容を明らかにすることを目的とする。1.　ADSCにより誘導されたHLCを“新たな薬剤添加・NH3 precondition”で高機能化し、その高機能HLCと血管内皮細胞とのオルガノイドを形成する。多細胞間の相互作用を人工的に再現することで、従来の分化誘導手法の抜本的改良を試みることができ、我々の目標とするSuper HLCを創出する。2.　ADSCからSuper HLCまでの過程における免疫原性を評価。3.　Super HLCの代謝性肝疾患モデルへの移植。R4年度は、ADSCからの分化誘導の過程,でこのHUVECを混入し、オルガノイドを作成した。Step２から、さらに、HUVECとADSCの細胞数比率は１：３で混入し、通常の3D HLCと比較した。形態学的には通常の3D HLCとオルガノイドに変わりなく、sizeもほとんど同じ程度であった。ただし、細胞集塊のViabilityを蛍光免染で評価したところ、3DHLCの方が、部分的に死細胞が存在しているがことがわかり、オルガノイドでは、細胞集塊中心部であっても、Viabilityは良好であった。肝細胞遺伝子発現では、オルガノイドでAATやCPS1などの発現が3D HLCよりもさらに高発現しており、肝細胞機能に関して、CYP3A4活性がオルガノイドで良好であった。

The differentiation guidance of HLC pluripotent cells may help to keep the liver cells in the same position and keep the HLC cells in the same position. It is necessary to establish a method for the formation of new liver cancer cells, such as liver cancer cells, liver cancer cells, and ultra-high-power liver cells (Super HLC). The transplant of Super HLC in his home is very important, and its immunogenicity is important. The purpose of this study is to understand the purpose of this study. 1. ADSC will guide the development of HLC, "add NH3 precondition to new computers", and HLC of vascular endothelial cells. The artificial effect of multi-cell interaction can be seen again, and the improved methods of differentiation and differentiation have been used to improve the quality of the disease, and our aim is to detect Super HLC. 2. The process of ADSC immunogenicity test is to determine the immunogenicity. 3. Super HLC patients with idiopathic liver disease were grafted for transplantation. In the R4 annual HUVEC and ADSC training, the process of differentiation is guided, and the data are mixed with each other to make a decision. The cell count ratio of Step2, ADSC, and HUVEC blends at 1:3, usually with a 3D HLC ratio. Generally speaking, 3D HLC is the same as that of size in the same degree. There are some dead cells in the cell collection, such as Viability, 3DHLC, and some dead cells. There are some dead cells in the cell, the center of the cell collection, the center of the cell, and the Viability is good. Liver cytopathic acid (AAT), liver cytosol (CYP3A4) and CYP3A4 activity (CYP3A4) were detected by 3D HLC imaging, liver cytometer and CYP3A4 activity.

项目成果

再生医療を用いた細胞移植治療確立へ向けた戦略～移植外科医・レシピエント双方の負担軽減という視点から

利用再生医学建立细胞移植治疗的策略——从减轻移植外科医生和受者双方负担的角度来看

• 发表时间: 2022
• 作者: 池本哲也;齋藤裕;島田光生;沖川昌平;寺奥大貴;山田眞一郎;森根裕二
• 通讯作者: 森根裕二

ヒト脂肪由来間葉系幹細胞から肝細胞様細胞の創出-肝不全・代謝性肝疾患に対する肝移植から細胞治療へ

利用人脂肪间充质干细胞创建肝细胞样细胞 - 从肝移植到肝衰竭和代谢性肝病的细胞疗法

• 发表时间: 2022
• 作者: 脇悠平;齋藤裕;池本哲也;陳術海;寺奥大貴;山田眞一郎;森根裕二;島田光生
• 通讯作者: 島田光生

Syngeneically transplanted insulin producing cells differentiated from adipose derived stem cells undergo delayed damage by autoimmune responses in NOD mice.

• DOI: 10.1038/s41598-022-09838-x
• 发表时间: 2022-04-07
• 期刊: Scientific reports
• 影响因子: 4.6
• 作者: Tokuda K;Ikemoto T;Yamashita S;Miyazaki K;Okikawa S;Yamada S;Saito Y;Morine Y;Shimada M
• 通讯作者: Shimada M