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メチルメルカプタン高産生能を示すP.gingivalisの特性

牙龈卟啉单胞菌具有高甲硫醇生产能力的特征

基本信息

批准号：
21932003
负责人：
岩崎代利子
金额：
$ 0.3万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21932003/
关键词：
メチルメルカプタン P.gingivalis 口臭関連ガス

项目摘要

【研究目的】:歯周病原細菌は、脱落上皮細胞、白血球、歯肉溝滲出液等をタンパク分解することで得られたメチオニンやシステインの代謝・合成から、硫化水素(H_2S)、メチルメルカプタン(CH_3SH)、ジメチルサルファイド((CH_3)_2S)といった口臭関連ガスである揮発性硫黄化合物(Volatile Sulfur Compounds、以下VSCs)を産生し、口臭症に関与している。歯周病原細菌の中でPorphyromonas gingivalis(P.g)はメチルメルカプタンの産生能が高いと報告されているが、同じP.gであっても臨床分離株においては、菌株レベルでVSCs産生能に違いがあると予想される。一般的に歯周病原細菌も垂直感染が主と考えられ、P.gingivalisのメチルメルカプタン高産生能株の検出・特性を解明することは口臭治療に多大な影響を与えると考える。本研究はP.gのVSCs産生能に関わる因子を明らかにするため、硫化水素、メチルメルカプタン、ジメチルサルファイドについて口臭症患者から分離したP.g臨床分離株および標準菌株を用いて、VSCsガス産生能の違いを菌株レベルで検討を行った。【研究方法】:1.P.g臨床分離株の分離と同定方法患者の5分間刺激唾液の10^5倍希釈したものをCDCバクテロイデス選択培地に播種し嫌気培養後黒色コロニーから染色体DNAを抽出し、PCR法を用いて16srRNAを増幅して確認した。2.P.g臨床分離株および標準菌株を用いて、L-メチオニン90分作用時のVSCsガス産生能の違いを菌株レベルで分析した。【研究成果】:標準菌株間でVSCs産生能を比較すると、硫化水素(H_2S)についてはW83,W50,11が高く、メチルメルカプタン(CH_3SH)についてはS-2,GT-6が高く、ジメチルサルファイド((CH_3)_2S)についてはW50,S-2が高い値を示した。臨床分離株においても3種それぞれのガスが優位に高い値を示す菌株が存在した。本実験から、P.gはメチルメルカプタンの産生能が高いと言われているが、P.g標準株及び臨床分離株へのL-メチオニン添加によるメチルメルカプタンの産生能は菌株間で違いがあることが明らかとなった。一方で、3種ガスの内、2種において高濃度のガス産生を示す菌株も存在した。これは産生経路に係わる酵素活性の違いなどによるものと考えられる。今後、これらの酵素活性に関して、産生能の高い菌株および低い菌株について遺伝子レベルでの検討が必要と考える。

[Research Purpose]: The detection of perinatal pathogenic bacteria, exfoliated epithelial cells, white blood cells, scrotal groove exudate, etc.ク decomposition of することでget られたメチオニンやシステインのmetabolism・synthesis of から, hydrosulfide ( H_2S), メチルメルカプタン(CH_3SH), ジメチルサルファイド((C H_3)_2S) Volatile sulfur compounds related to bad breath (Volatile Sulfur Compounds, the following VSCs) are produced, and halitosis is related. Porphyromonas gingivalis(P.g)はメチルメルカプタンの成能が高いとreportされているが、同じP.gであってもclinical isolate においては, strain レベルでVSCs can produce にvioli いがあるとyuthink される. Common peripheral pathogenic bacteria are mainly vertically infected, P. gingivalis and P. gingivalis.カプタンの検出・Characteristics することは bad breath treatment に大なeffect を and えるとtestえる. In this study, the production energy of P.gVSCs was determined by the factorめ, hydrogen sulfide, メチルメルカプタン, ジメチルサルファイドについてHalitosis patients からisolationしたP.g clinical isolate およびstandard strain をいて, VSCsガスproduced able のviolation いを strain レベルで検 Discussion を行った. [Research method]: 1. P.g clinical isolates were isolated and the patient's saliva was stimulated in 5 minutes using the same method as 10^5 times of the CDC's The black chromosomal DNA was extracted after sowing in the soil and cultured, and the PCR method was used to amplify the 16srRNA and confirm it. 2.P.g Analyzes of clinical isolates of the standard strain of および using いて and L-メチオニン 90 minutes of action of VSCs that can produce のviolation of the いを strain of いベルで. [Research results]: Comparison of VSCs production capacity among standard strains: すると, hydrosulfide (H_2S) についてはW83, W50, 11 が高く, メチルメルカプタン( CH_3SH)についてはS-2,GT-6が高く、ジメチルサルファイド((CH_3)_2S)についてはW50,S-2が高い値をshowした. Clinical isolates においても 3 kinds of それぞれのガスがに高いイをshows す strains がした. This 実験から, P.gはメチルメルカプタンの generates high-quality standard strains and clinical isolates of P.gへのL-メチオニン adds によるメチルメルカプタンの to produce the でviolated いがあることが明らかとなった between strains. One, three kinds of strains, and two kinds of strains that produce high concentrations of strains show the presence of strains. The enzyme activity of これは is generated by the 経路に-type わる enzyme. From now on, it is necessary to test the high enzyme activity and the low production capacity of the strain.