歯周病原細菌P.gingivalisの線毛における新たな遺伝子型解析

牙周病原菌牙龈卟啉单胞菌菌毛的新基因型分析

基本信息

批准号：
22K21050
负责人：
榮宏太朗
金额：
$ 1.83万
依托单位：
Aichi Gakuin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-08-31 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

グラム陰性偏性嫌気性桿菌Porphyromonas gingivalisは歯周病の代表的な原因細菌として知られている。本菌は付着因子としてFimA及びMfa1線毛を持つ。これらの線毛は主要成分であるFimA及びMfa1タンパク質により構成されるが、その他にそれぞれ4つの微量成分FimB～FimE及びMfa2～Mfa5が含まれる。fimAはその遺伝子配列の違いによってgenotypeI～V型に分類されるが、fimA型と病原性との関連性については不明な点が多い。一方、mfa1のgenotypeについては解析が進んでいなかったが、近年我々は mfa1が53、70A及び70B型に分類されることを明らかにし、微量成分の遺伝子型解析にも着手し、mfa2～mfa5及びfimB～fimEにおいても異なる遺伝子型が存在することも報告した。本研究では、P. gingivalisの全ての線毛成分の遺伝子型分類を可能とする手法を確立すると共に、開発した方法により歯周炎患者のFimA線毛及びMfa1線毛の遺伝子型分類を試み、臨床症状との関連性を調査することを目的とした。現在までに、既報のプライマー及び新規に設計したプライマーを用いて主要成分fimA及びmfa1のPCRを実施した。新規に設計したプライマーではそれぞれのmfa1型が特異的に増幅されることが確認された。第64回歯科基礎医学会学術大会にて「Porphyromonas gingivalisのmfa1下流因子の遺伝子型解析」という題で発表を行った。(1)mfa2～mfa4は70と53型の遺伝子型に分られ、それらの遺伝子型はmfa1型と一致した。ただし、70型のサブタイプは認められなかった。(2)一方、mfa5はA～Eの遺伝子型に分類され、mfa5がタンデムに存在する株が認められた。(3)mfa1型は、ragA/ragB遺伝子型と相関する傾向が認められたが、mfa5型との相関は認められなかった。との研究結果を報告し、mfa1型とmfa2～mfa5型、およびragA/ragB型との関連性について発表した。現在、臨床サンプルを用いた研究をスタートするために倫理委員会申請等の準備をすすめている。

革兰氏阴性症厌氧杆菌斑岩牙龈牙龈被称为牙周疾病的主要原因细菌。该细菌具有FIMA和MFA1 PILI作为粘附因子。这些pili由主要成分FIMA和MFA1蛋白组成，但也分别包括四个痕量成分FIMB-菲姆和MFA2-MFA5。根据其基因序列的差异，FIMA被分类为I-V类型的基因型I-V类型，但是关于FIMA类型与致病性之间的关系有许多未知。另一方面，尽管MFA1的基因型尚未进行分析，但近年来，我们透露MFA1被分类为53、70A和70B型，并且也开始对痕量组件进行基因型分析，并且还报告了MFA2-MFA5和FIMB-Fime中存在不同的基因型。这项研究旨在建立一种方法，该方法能够对牙龈疟原虫中所有pilus成分进行基因型分类，并通过尝试使用开发方法在牙周炎患者中尝试对FIMA PILUS和MFA1 PILUS进行基因型分类来调查与临床症状的关联。迄今为止，已经使用先前报道的引物和新设计的引物进行了主要组件FIMA和MFA1的PCR。已经确认，每种MFA1类型都被新设计的引物特异性扩增。该演讲是在基础牙科医学协会第64届学术会议上，标题为“ MFA1下游因子的斑岩孔孔纳斯牙龈膜的地理型”。（1）将MFA2至MFA4分为70型和53型的基因型，其基因型与MFA1一致。但是，未观察到70型的亚型。（2）另一方面，将MFA5分类为A-E基因型，并观察到串联中存在MFA5的菌株。（3）MFA1类型具有与RAGA/RAGB基因型相关的趋势，但与MFA5类型无关。该研究的结果报道了MFA1类型，MFA2-MFA5类型和RAGA/RAGB类型之间的关系。目前，我们正在促进为伦理委员会等申请的准备，以开始使用临床样本进行研究。