ゲノムに変異を導入した細胞のクリアランスから探るマウス精子品質管理機構

通过清除基因组中引入突变的细胞探索小鼠精子质量控制机制

• 批准号: 24924007
• 负责人: 高瀬 洋子
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: National Institute for Basic Biology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24924007/
• 关键词: 突然変異頻度; 精子幹細胞; マウス

有性生殖を行う雄の個体は、幹細胞に支えられた精子形成過程を通して、正確な遺伝情報を有する多数の精子を長期間にわたり産生する。この過程において遺伝情報は、高い正確性を保持し次世代に伝達されることが知られている。しかし、幹細胞に突然変異が生じた場合には、変異ゲノムを持つ精子がそのまま産生され次世代に伝わるのか、或いは選択的に変異細胞が除去され、正確な遺伝情報を保持した精子が産生されるのかは分かっていない。そこで、変異原を用いて積極的に精子形成細胞に突然変異を誘発し、変異を持った細胞がどの程度除去されるのか、検証を試みた。変異原として用いたブスルファンは、高用量(40～44mg/kg)投与で強い生殖細胞毒性を示す薬剤であるが、低用量(10mg/kg未満)投与時には一過性の組織傷害を生じる。そこで、低用量のブスルファン投与によってゲノムDNAに導入される突然変異をBig Blueシステムによって検出できるか検討した。ブスルファン10mg/kg投与では、生殖細胞の脱落が認められ、調製できたゲノムDNA量が少なく、突然変異頻度を検証できなかった。一方、ブスルファン5.0mg/kgの投与群では、若干の生殖細胞の脱落が認められるものの、ゲノムDNA収量が大幅に減少することもなく、突然変異頻度を検討できた。ブスルファン5.0mg/kg投与21、42、63日後に精巣を採取し、精巣細胞全体の突然変異頻度の経時変化を検討したところ、ブスルファン投与群では対象群に比して突然変異頻度の上昇が認められた。また、この時間経過において突然変異頻度は、ブスルファン投与から日数を経るに従って上昇傾向を示した。今後、より長期に渡る品質管理を研究する基盤を整えることができたと考えている。このとき、マウス個体数、さらに総プラーク数を増やして青色プラーク数の検出数を増やすことによる慎重な検討が必要である。

Sexual reproduction of male and female stem cells in the process of sperm formation, accurate information, most of the sperm production The process of transmission of information is highly legitimate, and the next generation of transmission of information is highly legitimate. When stem cells are suddenly different, they are different from each other. When stem cells are different from each other, they are different from each other. When stem cells are different from each other, they are different from each other, they are different from each other. When sperm is different from each other. When sperm is different from each other. When stem cells from each In addition, the positive sperm formation cells were induced to change, and the positive sperm formation cells were removed to a certain extent. When administered at high doses (40~44mg/kg), strong germ cell toxicity was observed, and when administered at low doses (10mg/kg), transient tissue damage was observed. In addition, a large number of small and medium-sized enterprises are involved in the construction of a large-scale enterprise. When administered at a dose of 10mg/kg, the amount of DNA in the germ cells was reduced and the frequency of sudden changes was observed. When the dose of 5.0 mg/kg was administered, the number of germ cells shed was significantly reduced, and the frequency of sudden changes was discussed. After administration of 5.0 mg/kg, the frequency of sudden changes in sperm cells was increased after 21, 42 and 63 days. The frequency of sudden changes in the time period and the number of days during the period show a tendency to increase. In the future, the quality management of long-term transition will be studied. The number of individuals, the number of individuals, the individuals, the number of individuals, the number of individuals, the individuals, the number of individuals, the individuals, the individuals, the

项目成果

人為的突然変異導入マウス生殖細胞における突然変異頻度の経時変化

人工突变小鼠生殖细胞突变频率的时间过程

• 发表时间: 2013
• 作者: 渡邊謙太;傳田哲郎;横田昌嗣;菅原敬;上野裕介;高瀬洋子
• 通讯作者: 高瀬洋子