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突然変異頻度から見るマウス精子形成過程における遺伝情報伝達の正確性

从突变频率看小鼠精子发生过程中遗传信息传递的准确性

基本信息

批准号：
22924014
负责人：
高瀬洋子
金额：
$ 0.36万
依托单位：
National Institute for Basic Biology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22924014/
关键词：
突然変異頻度精子形成過程遺伝情報

项目摘要

精子形成過程は、正確な遺伝情報を持つ膨大な数の精子を絶えず生産するという他には見られない特徴を有する。ところが、精子を通して次世代に伝わる遺伝情報の正確性がどのように保証されるのか、その実体は未だ明らかではない。そこで、精子形成過程における情報伝達の保存の実体を明らかにするために、マウス精巣より「全生殖細胞」とともに「未分化型精原細胞」「分化型精原細胞」「一次精母細胞」「精子細胞」「精子」の各段階の突然変異頻度を定量し、精子形成に至るまでの遺伝情報保証機構の検証を試みている。本研究では、生殖細胞がGFPでラベルされ、且つ、突然変異頻度検証系に適用できる遺伝子改変(Tg)マウスを作出した。このTgマウス精巣から調製した細胞を、GFPを指標にソーティングし、生殖細胞を分取した。さらに、精原細胞・一次精母細胞・精子細胞の各細胞群を精度良く分取するため、DNA染色蛍光試薬により定量した核酸量や、細胞のサイズ等のパラメータの検討を重ねた。その結果、95%以上の精度で、再現性良く各細胞群を分取する手法を確立した。精子は精巣上体尾部から外科的に調製した。一方、突然変異頻度を生殖細胞と比較する体細胞試料として、Tgマウスの脳及び肝臓を用いた。各組織からゲノムDNAを調製し、内在性(自然)突然変異を高感度に測定できるBig Blue【○!R】システム(Agilent社)によって、突然変異頻度を定量した。以上のように確立した技術を用いて、今後、各生殖細胞群の突然変異頻度を定量する。

During the process of spermatogenesis, the number of spermatozoa was enlarged and the number of spermatozoa was inflated. The sperm will pass through the next generation to make sure that the sex is correct and that the body is not clear. In the process of spermatogenesis and spermatogenesis, the process of spermatogenesis and spermatogenesis is well established. The body is clear, the whole reproductive cell, the undifferentiated spermatogonia, the differentiated spermatogonia, the primary spermatogonia, the spermatozoa, the spermatozoa, the sperm, the sperm. The spermatozoa was not formed until the spermatogenesis was carried out. In this study, GFP cells and reproductive cells were used in this study. In this study, the reproductive system, reproductive system and reproductive system were used in this study. "Tg" means "cell", "GFP" means "cell", "cell" and "reproductive cell". The accuracy of each group of spermatozoa, spermatozoa, spermat The results showed that the accuracy was more than 95%, and each group of cells with good sex was selected to determine the accuracy. Sperm sperm, upper body and tail, surgical tail, upper body and tail. On the one hand, the reproductive cells were used more frequently than those in the body, Tg cells and liver cells. Each organization is responsible for the DNA response, the internal (natural) response, the high sensitivity measurement, the Big Blue [0R] sensitivity measurement (Agilent), the sudden response, the quantitative measurement. The above measures are used to ensure the use of technology. in the future, each reproductive cell population will be measured in a sudden manner.