肺パスツレラの微生物モニタリング方法の検討

肺巴氏杆菌微生物监测方法的探讨

基本信息

批准号：
24930020
负责人：
中村直子
金额：
$ 0.38万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24930020/
关键词：
実験動物肺パスツレラ微生物モニタリング

项目摘要

研究目的精度や再現性の高い動物実験をおこなうためには、実験動物の品質管理の1つである微生物モニタリングが大変重要である。しかし、モニタリング項目の1つである肺パスツレラ(Pasteurella pneumotropica : Pp)は通常のモニタリング方法ではモニターマウスでの摘発が困難であるため、Ppを摘発出来る微生物モニタリング方法を確立することを目的とした。研究方法熊本大学生命資源研究・支援センター動物資源開発研究施設内で飼育されている実験中のマウスから培養検査によりPp陽性マウスを摘発する。Pp陽性マウスのケージに、購入したSPF、4週齢、♀のCrj : ICRマウスを同居させ、Pp自然感染マウスを作成する。Pp自然感染マウスの培養検査をおこなってPpのマウス体内分布を調べる。Pp自然感染マウス飼育中飼育室内環境からのPp分離を試み、モニターマウスのケージに混和するのに適した材料および採取時期を探す。モニターマウスのケージに混和するのに適していると予想した材料を実際にモニターマウスのケージに混入し、Ppが摘発出来るか確認をおこなう。研究成果Pp自然感染マウスの口腔スワブ、気管からは100%、結膜、膣からはそれぞれ80、60%と比較的高率に、被毛からも40%の個体からPpが分離できたが、胃、小腸内容物、盲腸内容物、糞便からはほとんど検出できず、分離された菌数も少なかった。マウスを飼育する環境については、マウスに給与後3日目の給水瓶中の飲水から2.5×10^5/mlのPpが分離できたが、床敷などその他の材料からは分離できなかった。そこで、Pp陽性マウス給与後3日目の給水瓶中の水0.1mlをオートクレープ滅菌水道水200mlに混和して2,000倍希釈し、モニタ-マウスと同じSPF、4週齢、♀のCrj : ICRマウスに飲水として与え、1週間継続して飲用させたところ、1週間後に50%のマウスの口腔スワブおよび気管からPpが摘発できたことから、給水瓶の水を利用するとモニターマウスにPp汚染を反映させることが出来る可能性が示唆された。

研究目的：为了进行高精度和可重复性的动物实验，微生物监测是实验动物的质量控制之一，这是极其重要的。但是，使用正常监测方法的监视器肺炎（PP）的一个监测项目之一很难检测到Monition小鼠，因此目的是建立一种可以检测PP的微生物监测方法。研究方法：PP阳性小鼠在库曼本大学动物资源开发研究中心进行的实验过程中被小鼠的培养基测试所吸引。 PP阳性的小鼠笼子与购买的SPF，4周龄，女性CRJ：ICR小鼠和PP自然感染的小鼠共同分享。进行了自然感染的PP小鼠的培养试验，以检查小鼠PP的生物分布。在繁殖过程中，PP自然感染的小鼠试图将PP与室内环境分离，并找到合适的材料和收集时间以在监视器小鼠笼中混合。我们期望适合将其混合到监视器鼠标笼中的材料实际上将其混合到监视器鼠标笼中，并检查是否可以捕获PP。研究结果：分别从口腔拭子和天然感染小鼠的气管中分离出PP，分别从气管中分离出100％，分别从结膜和阴道中分离出80％和60％，而从外套中分离出40％，但几乎无法在胃，小肠，小肠，盲肠含量和粪便，以及分离的Bacteria的数量中发现。关于饲养小鼠的环境，在喂养小鼠后的第三天，可以将2.5×10^5/ml的PP与水瓶中的水分开，但不能与其他材料（例如床上用品）分开。因此，在喂食PP阳性小鼠后的第三天，水瓶中的水与200 mL无菌自来水混合并稀释了2,000次，并将其与Monitor-Mouse（4周大的雌性CRJ：ICR小鼠）作为饮用水，并连续喝一周。一周后，PP被捕获在口腔拭子和50％小鼠的气管中，这表明使用水瓶可以反映显示器小鼠中的PP污染。