赤色蛍光タンパク質を用いた脳腫瘍マウスモデルの生体イメージング法の開発

红色荧光蛋白脑肿瘤小鼠模型生物成像方法的开发

• 批准号: 24931043
• 负责人: 加藤 彰
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24931043/
• 关键词: 脳腫瘍; RCAS/tv-aシステム; 生体イメージング

「研究目的」脳腫瘍のマウスモデル(RCAS/tv-aシステム)を用い、赤色蛍光タンパク質(mKate2)による簡便かつ正確な生体イメージング法の開発を目的とする。1年間の研究期間で、赤色蛍光タンパク質を癌遺伝子と共にウイルスでマウス脳細胞へ導入し、マウスの脳から発生した腫瘍が緑色励起光で光るシステムを確立する事を目的とする。「研究方法」RCAS/tv-aシステムで用いるRCAS vectorは、挿入可能な遺伝子の大きさが2.5kbまでであり、複数の遺伝子をベクターに組み込む事が困難なため、gag-po1、envを欠失させたRCASベクターを作製し、Gatewayシステムを用い、複数の遺伝子を同時に組み込むベクターを構築。癌遺伝子(PDGFB)、mKate2を組み込んだ発現ベクター(RCAS Δpe DV-PDGFB-mKate2)を構築。タンパク質発現ベクターを用い、gag-po1,envタンパク質が高発現しているDF-1細胞をクローニング。ウイルスを産生するDF-1パッケージング細胞をマウス脳内に注入。脳腫瘍の発生したマウスを生体イメージング用機器で観察する。「研究成果」Gatewayシステムを用い、gag-pol、envを欠失させたRCASデスティネーションベクター(RCAS Δpe DV)を作製。RCAS Δpe DV-PDGFB-mKate2ウイルスを作製したが、転写干渉により、複数の遺伝子を同時に発現する事は出来なかった。その代替案として、RCASBPとRCAS Δpe DV-E2F1-mKate2を同時に導入したDF-1細胞、RCAS DV-PDGFBを導入したDF-1細胞をマウス脳内に打ち込む事により、マウス脳内にて、赤色蛍光を観察する事が出来た。この結果は、マウスモデルで、非侵襲的な生体イメージングを可能にする大変有意義なものである。

"Objective": To develop a simple and accurate method for the treatment of cancer by means of RCAS/tv-a system. During the study period of 1 year, the red light source was used to establish the target of cell transformation, cell regeneration, and green light source. "Research method" RCAS/tv-a system is used in the RCAS vector, which can be inserted into the large number of possible vectors. It is difficult to assemble multiple vectors. It is difficult to assemble multiple vectors. It is used in the RCAS system. It is used in the Gateway system. It is also used in the multiple vectors. PDGFB and mKate 2 are constructed as a group. DF-1 cells are highly sensitive to high levels of plasma development, gag-po1,env. The DF-1 gene is produced by a single cell line and injected into the cell line. The selection process is performed by a machine. "Research results" Gateway system uses, gag-pol, env, etc. RCAS system uses (RCAS Δpe DV) RCAS Δpe DV-PDGFB-mKate2 is a multiple-function system, which can be used to control, control, and detect multiple components simultaneously. RCAS Δpe DV-E2F1-mKate2 was introduced into DF-1 cells simultaneously, and RCAS DV-PDGFB was introduced into DF-1 cells. The result is that it is possible to make a significant difference in the presence of non-invasive organisms