超念波照射を応用した迅速で安定した神経・髄鞘染色プロトコールの確立

利用超声辐射建立快速稳定的神经/髓鞘染色方案

• 批准号: 25930019
• 负责人: 八田 秀樹
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: University of Toyama
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-25930019/
• 关键词: KB染色; 超音波; キャビテーション

Klüver-Barrera (KB)染色は、神経脱髄性疾患の診断に不可欠な特殊染色であり、通常のプロトコールでは2日間にまたがる作業が必要となる。また、染色や分別時間が設定されていないため、染色者の経験と判断の差が染色結果の差に直結している。近年、マイクロ波(MW)照射を用いるKB染色の時間短縮法が報告されているが、専用のMW照射装置が高価である事、適切な照射条件の設定が煩雑である事、照射による急激な昇温で染色液の減少や濃度の変化等の不具合が生じる事、などいくつかの問題点が指摘され、普及するには至っていない。我々はこれまで、超音波(US)照射で生じる「キャビテーション」による高い撹拌・浸透効果が、固定・脱脂・脱灰や免疫染色における時間短縮に有効である事を報告してきた。同時に、キャビテーションは組織の挫滅と云った負の効果も示すことから、キャビテーション軽減剤等の添加で、組織の挫滅を軽減する方法も工夫してきた。今回、市販の超音波洗浄装置を用い、US照射による迅速KB染色法の確立を試みた。その結果、US照射によりMW照射と同等の時間短縮効果が認められ、また、従来の分別液を炭酸リチウムから炭酸水素ナトリウムに変更することで染色時間と分別時間の設定が可能となり、迅速で安定した再現性の高い染色像が得られることがわかった。市販の超音波洗浄装置を用いた迅速KB染色は安価で導入が可能であり、照射条件設定などの煩雑な操作も不要である。また、キャビテーション軽減剤としてUS照射時に併用した炭酸ガスは、通常の胃X線検査で使用されている市販の発泡剤であり、使用法は容易である。この方法の最大の利点は、染色と分別時間を確定して再現性の高い染色が可能になったことである。そして、炭酸ガスとUSを併用し炭酸水素ナトリウムで分別する本法は、安定した染色性を兼ね備えた、迅速で再現性の高い染色法と考えられた。

Klüver-Barrera (KB) staining is necessary for diagnosis of neurodegenerative diseases. The difference between the dyeing time and the dyeing result is directly related to the difference between the dyeing time and the judgment time. In recent years, the time shortening method of KB staining in the use of microwave (MW) irradiation has been reported, and the use of MW irradiation devices has been highly problematic, and the setting of appropriate irradiation conditions has been problematic. I would like to report that ultrasound (US) irradiation can produce a "quick test", such as high mixing and soaking effects, fixation, degreasing, deashing, and immunostaining, which can shorten the time and are effective. At the same time, the organization of the failure of the cloud negative effect of the display, the organization of the failure of the reduction of the method of time The rapid KB staining method was established by using ultrasonic washing equipment and US irradiation in the market. As a result, US irradiation, MW irradiation and equivalent time shortening effect are recognized. Carbon and water are separated from each other. The setting of staining time and separation time is possible. Rapid, stable and highly reproducible staining images are obtained. Market ultrasonic cleaning device can be used quickly KB dyeing, safe introduction, irradiation conditions setting, operation, etc. The use of carbon dioxide during US irradiation is easy for ordinary gastric X-ray examination. The maximum advantage of the method is that the staining time is determined and the reproducibility is high. This method is stable and reproducible.

项目成果

A simple and rapid decalcification procedure of skeletal tissues for pathology using an ultrasonic cleaner with D-mannitol and formic acid

• DOI: 10.1016/j.acthis.2014.01.006
• 发表时间: 2014-01-01
• 期刊: ACTA HISTOCHEMICA
• 影响因子: 2.5
• 作者: Hatta, Hideki;Tsuneyama, Koichi;Imura, Johji
• 通讯作者: Imura, Johji

硬組織の脱灰操作に対する超音波洗浄機の有効性

超声波清洗机对硬组织脱钙操作的有效性

• 发表时间: 2013
• 作者: 志賀真理;下村英毅;西山紋惠;谷澤隆邦;荒田晶子;金津嘉徳;金津嘉徳;Hideki Hatta;八田 秀樹;八田 秀樹
• 通讯作者: 八田 秀樹

硬組織に対する迅速な脱灰法の検討―染色性の保持を目指して―

硬组织快速脱钙方法的研究 - 旨在保持染色性 -

• 发表时间: 2013
• 期刊: 生理学・生物学技研報
• 作者: 志賀真理;下村英毅;西山紋惠;谷澤隆邦;荒田晶子;金津嘉徳;金津嘉徳;Hideki Hatta;八田 秀樹
• 通讯作者: 八田 秀樹