ヒト胎児肝細胞の糖質および脂質代謝に及ぼすステロイドの影響

类固醇对人胎儿肝细胞碳水化合物和脂质代谢的影响

• 批准号: 26927006
• 负责人: 竹澤 崇
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26927006/
• 关键词: ヒト肝細胞; 糖質・脂質代謝; ステロイド

研究目的胎児の肝細胞(HFL細胞)での糖代謝および脂質代謝についてHepG2細胞と比較し、胎児肝の糖代謝および脂質代謝に及ぼすステロイドの影響について明らかにすることを目的とした。研究方法1. HFL細胞およびHepG2細胞の核内受容体(GRα、PPARα、LXRαなど)や転写因子HNF4αの発現の有無をRT-PCRによりmRNAレベルで検討した。2. HFL細胞およびHepG2細胞に2種類のステロイド(dexamethasone, prednisolone)およびPPARαのアゴニストであるGW7647を添加し、糖質および脂質代謝に関与するPCK1(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1)、SREBP1c(sterol regulatory element-binding proteinlc)の発現についてリアルタイムPCRを用いmRNAレベルで解析した。研究成果1. HFL細胞においてGRα、HNF4α、PPARα、LXRαの発現はRT-PCRで確認されたが、HNF4α、PPARαの発現はHepG2と比較して低いことが電気泳動写真より明らかとなった。2. HFL細胞およびHepG2細胞にステロイドを処理したところ、HepG2細胞ではDEX処理でPCK1の発現量の増加が確認された。一方、HFL細胞ではPCK1の発現量に変化は認められなかった。3. HFL細胞およびHepG2細胞にPPARαの強力なアゴニストであるGW7647を処理すると、HepG2細胞ではSREBP1cの発現量が有意に増加し、PCK1についても有意差は認められないものの増加傾向を示した。しかし、HFL細胞ではGW7647を処理してもSREBP1cやPCK1の発現に変化は認められなかった。本研究の結果からHFL細胞では脂質代謝に関わるPPARαおよび糖新生に関わる転写因子HNF4αがHepG2細胞に比べ低発現であることが確認されたとともに、ステロイドおよびPPARαアゴニストによる応答性がHFL細胞とHepG2細胞で異なる可能性が示唆された。

Objective To investigate the effects of glucose metabolism and lipid metabolism in fetal liver cells (HFL cells) on HepG2 cells. Methods 1. The expression of nuclear receptors (GRα, PPARα, LXRα) and HNF4 α in HFL cells and HepG2 cells was investigated by RT-PCR. 2. HFL cells and HepG2 cells contain two types of dexamethason, prednisolone, PPARα, GW7647, carbohydrate, lipid metabolism, PCK1 (phosphoenolpyruvate kinase 1) and SREBP1c (sterol regulatory element-binding protein lc). Results 1. The expression of GRα, HNF4 α, PPARα and LXRα in HFL cells was confirmed by RT-PCR. The expression of HNF4 α and PPARα in HepG2 cells was compared with that in control cells. 2. The increase in PCK1 production in HFL cells and HepG2 cells treated with DEX was confirmed. One side, HFL cells, PCK1 and the amount of production, change and recognition. 3. HFL cells and HepG2 cells were treated with GW7647 for PPARα, HepG2 cells were treated with GW7647 for PPAR α, HepG2 cells were treated with GW7647 for PPAR α. HFL cells are processed by SREBP1c and PCK1. The results of this study confirm that HFL cells are less likely to respond to PPAR α than HepG2 cells in lipid metabolism.