Ｐ糖蛋白質発現調節を介した抗がん剤耐性機構におけるｍｉｃｒｏＲＮＡ－１４５の役割

microRNA-145通过调节P-糖蛋白表达在抗癌耐药机制中的作用

• 批准号: 26926015
• 负责人: 山本 弥里
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26926015/
• 关键词: マイクロRNA; P-糖蛋白質; 卵巣癌

臨床において抗がん剤耐性の克服は重要な課題であり、耐性化の要因としてP-糖蛋白質(P-gp)の過剰発現と機能活性化が知られている。近年では、microRNA(miRNA)のP-gp発現調節を介した抗がん剤耐性化への関与が示唆されている。なかでも、microRNA-145(miR-145)は多くの癌細胞で発現低下が報告されており、申請者らはこれまでに、小腸上皮細胞においてmiR-145発現低下がP-gpの発現・機能を亢進させることを示唆した。本研究では卵巣癌細胞におけるmiR-145を介したP-gp発現変動を解析し、miR-145の抗がん剤耐性化への関与を検討した。ヒト卵巣癌細胞(A2780細胞)とそのアドリアマイシン耐性細胞(A2780/ADR細胞)におけるmiR-145発現量とP-gp発現量を定量したところ、A2780/ADR細胞においてmiR-145及びP-gpの過剰発現を認めた。さらにA2780/ADR細胞にmiR-145阻害剤を導入したところ、P-gp発現量に変動は認められなかった。従って卵巣癌細胞の薬剤耐性化において、miR-145を介したP-gp発現上昇の寄与は小さい可能性が示唆された。この結果に基づき、卵巣癌の抗がん剤耐性化に関与するmiRNAを探索するため、A2780細胞とA2780/ADR細胞に発現するmiRNAを網羅的解析し、併せてin silico解析によりP-gp発現調節に関わる可能性のあるmiRNAを抽出した。A2780細胞と比較しA2780/ADR細胞で有意な変動が認められたmiRNAのうち、P-gpに結合すると予測されるものを8種認めたが、いずれも結合が不安定でありP-gpの発現調節に直接関わる可能性が低いことが示唆された。一方で、P-gpの転写因子であるNF-kBやYB-1遺伝子に結合し得るmiRNAが見出された為、P-gp発現上昇にはmiRNAを介した間接的制御が関与する可能性が示唆された。本研究から、卵巣癌細胞の抗がん剤耐性化に伴うmiR-145の挙動や、miRNA発現プロファイルに関する重要な基礎情報を得ることができた。今後、miRNA発現変動と抗がん剤耐性化との関連をさらに明らかにすることで、miRNAは薬剤選択や用量決定の有用な指標となり得ることが期待される。

The important problem of overcoming resistance in clinical practice is to understand the main causes of resistance and the over-expression and functional activation of P-glycoprotein (P-gp). In recent years, microRNA(miRNA) regulation of P-gp expression has been implicated in the development and maintenance of resistance to miRNA. MicroRNA-145(miR-145) is reported to be low in many cancer cells, and is also reported to be low in small intestine epithelial cells, and P-gp is reported to be hyperactive. This study aims to analyze the changes in P-gp expression mediated by miR-145 in ovarian cancer cells and investigate the relationship between miR-145 and its anti-cancer resistance. MiRs-145 and P-gp production were quantified in human ovarian cancer cells (A2780 cells) and resistant cells (A2780/ADR cells). MiRs-145 and P-gp production were also quantified in A2780/ADR cells. A2780/ADR cell line miR-145 inhibitor is introduced into the cell line and P-gp expression is detected. The increase of P-gp expression mediated by miR-145 and the possibility of reverse transcription are also indicated. The results showed that miRNA expression in A2780 cells and A2780/ADR cells was detected by PCR, and miRNA expression was detected by PCR. A2780/ADR cells were compared with A2780/ADR cells, and the possibility of direct regulation of P-gp expression was low. The possibility of miRNA binding to P-gp gene expression factors, such as NF-kB and YB-1 gene expression factors, was demonstrated. This study aims to provide essential information on miR-145 activation and miRNA expression in ovarian cancer cell line resistance. In the future, miRNA expression changes, resistance changes, and correlation between miRNA expression and resistance changes will be discussed. MiRNA expression changes, resistance changes, and correlation between miRNA expression and resistance changes will be discussed.