TNFαによるヒト骨肉腫細胞のα5β1インテグリン発現動態と浸潤転移における役割

TNFα诱导人骨肉瘤细胞α5β1整合素表达动态及其在侵袭转移中的作用

• 批准号: 08770151
• 负责人: 川島 篤弘
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770151/
• 关键词: インテグリン; 骨肉腫; フィブロネクチン; 培養細胞; TNFα

低転移性であるヒト骨肉腫培養細胞OSTにおける各種インテグリンの発現をRT-PCR法を用いてさらに詳細に調べるために,ヒトで恒常的に発現しているといわれているβ2-microglobulinの発現量と比較することによってその増減を検討した.PCRによる増幅は,21サイクルから最初のスクリーニングで行った35サイクルの範囲で,β2-microglobulinの発現量がTNFα刺激前後で変化がないことを確認した.未処理OSTはα2,α3,α5,α6,αv,β1,β5,β6を発現しているが,TNFα刺激を受けるとα5ばかりでなくα3も激減した.α2,β1の発現量も有意に減少した.一方,α6は発現量が増加した.αv,β5,β6の発現量には差みられなかった.TNFα刺激によって新たにβ8の発現が確認された.このことから予想されることは,フィブロネクチンレセプターとしてのα5β1の減少,コラーゲンレセプターとしてのα2β1,α3β1の減少である.ビトロネクチンレセプターとしてのαvβ5の発現量に変化はみられなかった.しかし,細胞接着試験では,フィブロネクチンおよびコラーゲンに対する接着性にそれぞれ差はなく,ビトロネクチンに対する接着性はTNFα刺激で有意に低下した.このことから,蛋白レベルでのインテグリンの減少がTNFα刺激24時間ではまだ十分ではなく,分解・消失せずに残っており機能しているためではないかと考えている.実際,免疫沈降法では,ケミコン社のα5に対する抗体を用いると,TNFα刺激24時間ではα5β1の減少がみられなかった.さらに遊走試験でも,TNFα刺激を24時間したOSTは,フィブロネクチン,ビトロネクチンをコートした場合の両者ともにcontrolに対して遊走能が亢進した.

The expression of β 2-microglobin in cultured cells with low mobility was measured in detail by RT-PCR. The expression of β2-microglobin was measured in detail by RT-PCR. The expression of β2-microglobin was measured by RT-PCR. The expression of β2-microglobin was measured by RT-PCR. β2-microglobulin production changed before and after TNFα stimulation. Untreated OST α2,α3,α5,α6,αv,β1,β5,β6 are present,TNFα stimulation is present, α5 is present, α3 is present.α2,β1 emission is intentionally reduced. On the one hand,α6 appears to increase.αv,β5,β6 were detected in different concentrations.TNFα stimulation was used to detect β8. The decrease of α5β1, α 2β1,α3β1 is the most important factor in the growth of α2β1,α3β1. The change of αvβ5 in the emission of αvβ5 in the emission In response to TNFα stimulation, cell adhesion tests were intentionally reduced. The protein content of TNFα was decreased after stimulation for 24 hours, and the protein content of TNF α decreased after stimulation for 24 hours. In fact, the immunosedimentation method was used to detect the α5 β 1-related antibody, and TNFα stimulated the α5β1-related antibody for 24 hours. In addition,TNFα stimulation can increase the activity of the tumor cells in 24 hours.