ヒト骨肉腫培養細胞におけるインテグリン分子の発現と浸潤能における役割

人骨肉瘤细胞培养中整合素分子的表达及其在侵袭能力中的作用

• 批准号: 07770148
• 负责人: 川島 篤弘
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770148/
• 关键词: インテグリン; 骨肉腫; フィブロネクチン; 培養細胞; TNFα

我々はこれまでに,低転移性であるヒト骨肉腫培養細胞OSTを用いて,細胞外マトリックスの分解に関わるMMP-9の発現が,浸潤転移にどのような役割を果たしているかを調べてきた.今回は,OSTにおける各種インテグリンの発現をRT-PCR法を用いてスクリーニングし,TNFα刺激によりどのインテグリンが増加あるいは減少するのか調べた.また,Fibronectin(FN),vitronectin(VN)をリガンドとする細胞接着試験を行った,さらに,細胞内伝達機構を調べる目的でPKC assayも行った.結果と考察 未処理OSTはα2,α3,α5,α6,αv,β1,β3,β5を発現しているが,TNFα刺激を受けるとα5の発現が激減した.免疫沈降法においても細胞表面のα5の減少が示された.αv,β1,β3,β5の発現には差は見られなかった.細胞接着試験では,FNに対する接着性に差はなかったが,VNに対する接着性はTNFα刺激で有意に低下した.またPKC活性はTNFαにより有意に低下した.FNは現在までに,FN分子中の細胞接着に関与する構造はRGD配列であることがわかっており,主としてα5β1(VLA-5)インテグリンがこの配列を認識する細胞膜レセプターであると言われている.OSTではα5の発現低下により正常に機能するフィブロネクチンレセプターの合成が障害され,基質に対する接着性の低下が運動能の増加をもたらし,さらにはMMP-9の分泌増加と相まって最終的にOSTの転移の増加につながったのではないかと推測している.PKC assayにおいて,protein kinaseの活性化剤として知られているPMA刺激でもPKCの活性が低下したので,OSTではインテグリンによって引き起こされる細胞内伝達機構にalternative pathwayがある可能性が示唆された.

The expression of MMP-9 in cultured osteoma cells is related to the extracellular decomposition of MMP-9, and the infiltration of MMP-9 in cultured osteoma cells. In this paper,OST is used to detect the expression of various genes, and TNFα is used to stimulate the expression of various genes. Fibronectin(FN),vitronectin(VN) are the most important components of the PKC assay. Results α2,α3,α5,α6,αv,β1,β3,β5 were detected in untreated OST, and α5 was stimulated by TNFα. The decrease of α5 on the cell surface was demonstrated by immunoprecipitation.αv,β1,β3,β5 appear differently. Cell adhesion test,FN adhesion test,VN adhesion test, TNFα stimulation test. PKC activity is intentionally decreased due to TNFα.FN is now present in the cellular structure of FN molecule, and RGD alignment is recognized as a key factor in the production of α5β1(VLA-5). The decrease of matrix adhesion and the increase of exercise energy, the increase of MMP-9 secretion and the increase of OST, the decrease of PKC activity, the decrease of protein kinase activity and the decrease of protein kinase activity, the decrease of protein kinase activity, the decrease of protein kinase activity and the decrease of protein kinase activity, the decrease of protein kinase activity, the decrease of protein kinase activity and the decrease of protein kinase activity. OST is the alternative pathway to intracellular transport.