プリステン免疫マウス血清中の経時的抗体測定による抗U1RNP抗体産生機序の解析

通过测量 Pristine 免疫小鼠血清中抗体随时间的变化来分析抗 U1RNP 抗体产生机制

• 批准号: 08770332
• 负责人: 小笠原 孝
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770332/
• 关键词: 自己抗体; 抗U1RNP抗体; 抗U1RNA抗体; モデルマウス; プリステン; モノクローナル抗体

1.BALB/c-byJマウス血清の回収:順次21匹のマウスにPristane(プリステン)の腹腔内注射を施行し、平均2.5週間隔で各マウスの採血(尾血管)を行い、自己抗体の検出・測定を行った。2.免疫酵素抗体法(ELISA)及び免疫沈降法(IP)による自己抗体の検出:ヒトの半分の血清量で免疫沈降法を通常に行い十分な検出感度・精度を得られた。メチオニン標識及び^<32>P標識HeLa抗原を用いた(hot)IP(hot)と銀染色でのcold IPDを駆使し検討した結果、機械油の一つであるプリステンのみにて注射後約4カ月より各種自己抗体が検出されはじめた。その種類は抗Su、抗RNP、抗tRNA、抗7-2RNA、抗Smなど多岐に渡り従来ヒトで疾患関連性を強く示唆されているものがあった。ELISAによるU1RNA、U1RNP構成polypeptide各鎖に対する抗体検出:免疫沈降法で5例(23.8%)に抗U1RNP抗体の誘導を確認した。in-vitro精製のU1RNAを用いたELISAにて内4例に抗U1RNA抗体活性を検出しえた。同抗体の免疫グロブリン型を検討するとIgG型が注射後約60日以降より徐々に増加していたが、注射後30-40日頃をpeakにIgM型抗U1RNA抗体の先行出現が認められた。一方構成polypeptide各鎖に対する自己抗体はほぼ同時期に出現しはじめ反応組み合わせに特異な型は認められなかった。これは採血周期の短縮で知見が深まると思われた。以上より抗U1RNAの出現誘導はIgMからIgG型となされている可能性と構成petideに対する抗体に先行しU1RNAに対する抗体が出現する可能性が示唆されていた。自己抗体の出現及び累積出現率は既報告に近似する出現時期がやや遅い半面、出現抗体の種類は特異性の高いものが含まれるなど差異がみられた。微妙な遺伝因子の違いのみならず飼育環境、共存ウイルスなど環境因子の影響が示唆されたと考えられる。

1. BALB/c-by-J serum recovery: 21 mice were injected intraperitoneally with Pristane at an average interval of 2.5 weeks. 2. Immunoenzyme antibody assay (ELISA) and immunoprecipitation assay (IP) are used to detect antibodies. HeLa <32>antigen was identified by IP(hot) and cold IPD (silver staining). The results of the study were as follows: machine oil was injected into HeLa antigen about 4 months after injection, and various antibodies were detected. The species are resistant to Su, RNP, tRNA, 7-2RNA, Sm, and multi-species. ELISA was used to detect antibodies against U1RNA and U1RNP. Immunoprecipitation was used to detect antibodies against U1RNP in 5 cases (23.8%). The activity of anti-U1 RNA antibody was detected in 4 cases by ELISA. The immune response of the same antibody was detected at 60 days after injection, and the IgG antibody decreased gradually until it peaked at 30-40 days after injection. Each of the two groups of antibodies appears at the same time. The blood collection cycle is shortened and the blood collection cycle is shortened. The possibility that anti-U1 RNA appears induced by IgM and anti-U1 RNA antibodies appears prior to U1RNA is indicated. The occurrence and cumulative occurrence rates of autoantibodies are similar to those reported, and the occurrence periods are different, and the types of autoantibodies are different. The influence of environmental factors on breeding environment and coexistence is studied.