U1RNA及び構成ペプチド鎖両面からのUIRNP抗原β細胞epitopeの分析

从 U1RNA 和组成肽链分析 UIRNP 抗原 β 细胞表位

• 批准号: 07770337
• 负责人: 小笠原 孝
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770337/
• 关键词: U1RNP; 自己抗体; ELISA; 免疫沈降法; 膠原病

U1DNAをpSP64vectorを用いXL-1blueに導入・増殖後templateとして使用しin vivo転写反応で大量均一のU1RNAを調整することを可能にした。更に制限酵素を使い分け免疫酵素抗体法(ELISA)・免疫沈降法(IPP)に使用するU1RNA抗原を調整し各測定を行った。IPP成績を参照したELISAの感度・特異度は共に必要十分であり、血清検体の測定に適用した。抗U1RNP抗体陽性患者132例では、同ELISAにより抗U1RNA抗体は78%に陽性と判定されたが、抗U1RNP抗体陰性例には全く検出されなかった。また抗U1RNA抗体の出現と抗Sm抗体の併存とは関連がなくHeLa細胞抽出のU1RNP抗原を用いたELISAにより抗U1RNP抗体価と抗U1RNA抗体価の間には明らかな正相関が認められた(r=0.56)。しかし電気的に泳動ゲル中より回収した構成ポリペブチド鎖(70K,A,B'/B,C)を固相抗原としてたELISAによる抗各鎖抗体価と抗U1RNA抗体価間では相関係数は最大でも0.35であった。かたやIgM型抗U1RNA抗体が高力価に検出し得た症例があり、またそれは抗U1RNP全抗体価上昇とほぼ同時期であり、同抗体のclass変動への関与が考えられた。経時的に抗体価を測定しえた症例において、発熱・炎症反応増強など病勢変動と抗U1RNA抗体価に運動を認めたものも存在した。構造上予想された抗A鎖抗体とidiotyoeとしての関連性は検出されず、またMCTDで問題にされる抗70K鎖抗体とも異なる動きを抗U1RNA抗体はすることから、この抗体自体の対応epitope (U1RNAのstem2,stem4部分)がU1RNP抗原分子の主要B細胞dpitopeである可能性が強く示唆された。

U1DNA pSP64 vector is used in XL-1 blue. After propagation, template is used in vivo to write a large number of uniform U1RNA. The restriction enzyme assay (ELISA) and immunoprecipitation assay (IPP) were performed using U1RNA antigen. The sensitivity and specificity of IPP test results were determined by ELISA. 132 cases of anti-U1 RNP antibody positive were detected by ELISA, 78% of them were positive, and all cases of anti-U1 RNP antibody negative were detected. The presence of anti-U1 RNA antibodies and the co-existence of anti-Sm antibodies were positively correlated with the presence of anti-U1 RNP antibodies and anti-U1 RNA antibodies in HeLa cells (r=0.56). The maximum correlation coefficient between anti-U1 RNA antibody and anti-U1 RNA antibody was 0.35. IgM anti-U1 RNA antibodies were detected at high levels and symptoms were detected. The rise of anti-U1 RNP antibodies occurred at the same time. Anti-U1 RNA antibodies are detected in all cases, including fever and inflammation. Structurally, the association between anti-A-lock antibodies and idiotyoe and anti-U1 RNA antibodies was strongly demonstrated in the MCTD problem, including the possibility that anti-70K-lock antibodies and anti-U1 RNA antibodies might be associated with the U1RNP antigen molecule in the major B cell dpitope (U1RNA stem2,stem4).